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一种检测猪圆环病毒不同型别的三重荧光定量PCR引物组、试剂盒及应用
本发明提供了一种检测猪圆环病毒不同型别的三重荧光定量PCR引物组、试剂盒及应用,涉及生物检测技术领域。本发明根据Genbank中猪圆环病毒2型、猪圆环病毒3型和猪圆环病毒4型的保守序列合成引物和探针,同时还构建了试剂盒,并用于猪疫病检测。本发明利用建立的荧光定量PCR体系对来自浙江省内83份猪组织样品进行检测,结果显示所述引物组特异性良好,重复性和稳定性俱佳,并且具有较高的一致性,准确率较高。在本发明中,PCV2、PCV3最低检测值均为10拷贝/μl,而PCV4最低检测值为1拷贝/μl,克服了当前猪圆环病毒2型、猪圆环病毒3型和猪圆环病毒4三重PCR检测方法敏感性低,易污染实验室等缺点。
同时检测辣椒三种RNA病毒的多重RT-PCR引物组及其方法
本发明公开了一种同时检测辣椒三种RNA病毒的多重RT-PCR引物组,引物对TMGMV-F和TMGMV-R为检测烟草轻型绿花叶病毒的引物,引物对CFEV1-F和CFEV1-R为检测小米椒内源RNA病毒1的引物,引物对PCV2-F和PCV2-R为检测辣椒潜隐病毒2的引物;本发明还公开了使用该多重RT-PCR引物组检测辣椒三种RNA病毒的方法,通过一次RT-PCR反应来检测植株是否感染上述三种病毒。本发明用三重RT-PCR检测三种辣椒病毒即烟草轻型绿花叶病毒、小米椒内源RNA病毒1和辣椒潜隐病毒2,与目前单重RT-PCR和双重RT-PCR检测方法相比,用一次RT-PCR反应可检测三种病毒,检测的病毒种类增多,检测效率进一步提高,检测的成本显著降低。
检测1型、3型鸭甲型肝炎病毒和鸭坦布苏病毒的引物及应用
本发明公开了一种检测1型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-1)、3型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)和鸭坦布苏病毒(DTMUV)的引物,并建立检测方法和制备检测试剂盒。本申请试剂盒方法简单、结果准确、灵敏度高,DHAV-3核酸的检测极限为10pg,DTMUV核酸的检测极限为10pg,DHAV-1核酸的检测极限为100pg,克服了多重引物互相干扰的问题,在临床检测中检测结果稳定。
一种反转录多重套式PCR检测引物
本发明属于基因型检测技术领域,公开了一种反转录多重套式PCR检测引物,引物包括两条外引物和三条内引物,外引物扩增YHV-1和YHV-8的目的基因,产生目的条带;三条内引物搭配分别特异性的扩增YHV-1和YHV-8,产生两种目的条带。本发明可灵敏的检测黄头病毒的致病基因型YHV-1和YHV-8,并通过产物大小鉴别两种基因型,用于制备上述病毒的鉴别、检测、监测等所需的反转录多重套式PCR的试剂或试剂盒,为该病毒的临床检测和流行病学研究提供了简便、可靠的技术支持。
一种检测禽传染性喉气管炎病毒的试剂盒和检测方法
本发明属于分子生物学领域,具体是涉及到一种检测禽传染性喉气管炎病毒的试剂盒和检测方法,包括AILTV-反应液、DNA酶混合液、AILTV-内标、AILTV-阳性对照和AILTV-阴性对照;本发明的灵敏度与特异性高,有效降低出现假阳假阴几率,并且可以“一步法”实现样品的快速可靠的检测。
用于检测多种HPV分型探针
本发明提供了用于检测多种HPV分型探针,包括底座,固定于所述底座顶端的伸缩式储液管,固定于所述伸缩式储液管顶端的负压吸斗,以及插接于所述负压吸斗顶端的引流探针,所述伸缩式储液管包括固定于所述底座顶端表面的静储纳管,以及插接于所述静储纳管顶端的动储纳管,所述静储纳管和动储纳管的一侧表面开设有开口,所述负压吸斗包括固定于所述动储纳管顶端的负压斗,以及插接与所述负压斗顶端且供所述引流探针穿插的密封盖,所述密封盖的顶端设有锁紧机构,所述密封盖与负压斗之间设有振动机构。本发明能够自动对用于检测的溶液进行汲取,并防止溶液飞溅,从而提高了汲取效率,并通过振动,使得储液针上的液滴甩落。
基于CRISPR/Cas12a技术快速检测新冠病毒和突变株的方法及试剂盒
本发明公开一种基于CRISPR/Cas12a技术快速检测新冠病毒和突变株的方法及试剂盒,属于生物技术领域。本发明通过LbaCas12/crRNA系统的单碱基分辨率能力,通过分别设计针对新冠病毒的非突变的靶点N501和突变靶点Y501的501-crRNA-W以及501-crRNA-M,对样品分子进行检测,只需要一台PCR仪或者恒温装置和简易荧光读取装置,当使用两个crRNA同时检测同一个样品的时候,可快速、有效区分待测核酸样品是非突变株还是突变株,同时具有高特异性、高灵敏度以及低成本的特点,更加广泛适用于各种分子诊断实验室。本发明对新冠病毒疫情防控具有重要意义。
一种检测SARS-CoV-2 RNA的探针组、ECL生物传感器及其制备方法和应用
本发明提供一种检测SARS-CoV-2RNA的系统,包括探针组和CRISPR/Cas12a系统和ECL生物传感器。在ZIF-8的表面链接了自增强的钌复合物,在不添加共反应物的情况下获得了高的分子内电子转移效率,从而获得了强而稳定的ECL信号。DSN参与的目标循环和CHA信号放大,既实现了信号的级联放大,又将不稳定的目标RNA转变成稳定的dsDNA进行输出。该策略中的dsDNA可以激活Cas12a的反式裂解特性,裂解与C-3N-4表现出亲和力的Fc标记的DNA探针。因此,目标RNA的浓度可以决定吸附在C-3N-4表面的Fc标记的DNA探针的数量,从而直接影响ECL强度。
快速检测病毒的试剂盒及其制备方法
本发明公开了一种快速检测病毒的试剂盒及其制备方法。本发明筛选获得特异性识别呼吸道合胞病毒F抗原单克隆抗体,将所述单克隆抗体标记量子点和其他抗体标记的硝酸纤维素膜制备获得抗体荧光量子点快速检测试纸,同时针对呼吸道合胞病毒P蛋白的基因序列进行分析,选取保守区设计RPA引物和探针,并制备成为相应的检测试纸条;将两个检测方法进行组合使用,能够进一步提高检测的准确性,从而及早诊断,利于患者尽快治疗,适于大规模推广使用。