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同时检测辣椒三种RNA病毒的多重RT-PCR引物组及其方法
本发明公开了一种同时检测辣椒三种RNA病毒的多重RT-PCR引物组,引物对TMGMV-F和TMGMV-R为检测烟草轻型绿花叶病毒的引物,引物对CFEV1-F和CFEV1-R为检测小米椒内源RNA病毒1的引物,引物对PCV2-F和PCV2-R为检测辣椒潜隐病毒2的引物;本发明还公开了使用该多重RT-PCR引物组检测辣椒三种RNA病毒的方法,通过一次RT-PCR反应来检测植株是否感染上述三种病毒。本发明用三重RT-PCR检测三种辣椒病毒即烟草轻型绿花叶病毒、小米椒内源RNA病毒1和辣椒潜隐病毒2,与目前单重RT-PCR和双重RT-PCR检测方法相比,用一次RT-PCR反应可检测三种病毒,检测的病毒种类增多,检测效率进一步提高,检测的成本显著降低。
检测1型、3型鸭甲型肝炎病毒和鸭坦布苏病毒的引物及应用
本发明公开了一种检测1型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-1)、3型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)和鸭坦布苏病毒(DTMUV)的引物,并建立检测方法和制备检测试剂盒。本申请试剂盒方法简单、结果准确、灵敏度高,DHAV-3核酸的检测极限为10pg,DTMUV核酸的检测极限为10pg,DHAV-1核酸的检测极限为100pg,克服了多重引物互相干扰的问题,在临床检测中检测结果稳定。
一种反转录多重套式PCR检测引物
本发明属于基因型检测技术领域,公开了一种反转录多重套式PCR检测引物,引物包括两条外引物和三条内引物,外引物扩增YHV-1和YHV-8的目的基因,产生目的条带;三条内引物搭配分别特异性的扩增YHV-1和YHV-8,产生两种目的条带。本发明可灵敏的检测黄头病毒的致病基因型YHV-1和YHV-8,并通过产物大小鉴别两种基因型,用于制备上述病毒的鉴别、检测、监测等所需的反转录多重套式PCR的试剂或试剂盒,为该病毒的临床检测和流行病学研究提供了简便、可靠的技术支持。
一种检测禽传染性喉气管炎病毒的试剂盒和检测方法
本发明属于分子生物学领域,具体是涉及到一种检测禽传染性喉气管炎病毒的试剂盒和检测方法,包括AILTV-反应液、DNA酶混合液、AILTV-内标、AILTV-阳性对照和AILTV-阴性对照;本发明的灵敏度与特异性高,有效降低出现假阳假阴几率,并且可以“一步法”实现样品的快速可靠的检测。
基于CRISPR/Cas12a技术快速检测新冠病毒和突变株的方法及试剂盒
本发明公开一种基于CRISPR/Cas12a技术快速检测新冠病毒和突变株的方法及试剂盒,属于生物技术领域。本发明通过LbaCas12/crRNA系统的单碱基分辨率能力,通过分别设计针对新冠病毒的非突变的靶点N501和突变靶点Y501的501-crRNA-W以及501-crRNA-M,对样品分子进行检测,只需要一台PCR仪或者恒温装置和简易荧光读取装置,当使用两个crRNA同时检测同一个样品的时候,可快速、有效区分待测核酸样品是非突变株还是突变株,同时具有高特异性、高灵敏度以及低成本的特点,更加广泛适用于各种分子诊断实验室。本发明对新冠病毒疫情防控具有重要意义。
一种基于靶向测序的枸杞S基因的快速分型鉴定方法
本发明涉及一种基于靶向测序的枸杞S基因的快速分型鉴定方法,依据若干参考枸杞品种的S基因设计探针,利用设计的探针组合物对待测枸杞样品的基因进行杂交捕获、测序分析,并将测序结果与参考枸杞品种的S基因进行比对,判断待测枸杞样品的S基因与所述参考枸杞品种的S基因是否匹配,确定待测枸杞样品S基因所匹配的参考枸杞品种。本发明针对多个待测SNP位点设计特异性扩增引物,利用靶向测序分型(GBTS)技术,实现枸杞S-RNase基因的快速分型鉴定。
基于细菌16S rRNA基因序列的细菌“种”水平检测和分析方法
本发明公开一种非诊断目的的基于细菌16S rRNA基因序列在“种”(species)水平上鉴定人体肠道菌群的方法。所述方法包括:(1)构建基于细菌操作系统发生学单元为基础的人肠道菌群16S rRNA基因参比序列库,(2)对待检测标本的16S rRNA基因进行序列测定;(3)将标本16S rRNA基因序列与16S rRNA基因参比序列库进行比对并进行菌种鉴定。本发明的方法可将人肠道菌群检测注释到“种”的水平,并揭示其多样性、构成比、丰度等数据。这些数据可用于分析人的肠道菌群是否失调,可发现是否存在已知病原菌、潜在致病菌等,可分析肠道益生菌的种类和丰度,可分析肠道菌群紊乱与健康状态、疾病等的相关性。
一种基于高通量测序的病原微生物多重扩增试剂盒和方法
本发明涉及物种鉴定技术,特别是一种基于高通量测序的病原微生物多重扩增试剂盒和方法,其特征在于,所述试剂盒包含细菌通用引物。基于这些通用引物组合对待测样品进行单管多重扩增,能够保证尽可能多的扩增出目标物种,同时又要保证所扩增的片段有足够的变异能够区分不同物种,是高通量测序及进行物种分析的基础。
一种用于鸽性别鉴定的PCR引物、试剂盒及其方法
本发明提供一种用于鸽性别鉴定的PCR引物、试剂盒及其方法,所述鸽性别鉴定用PCR引物序列如SEQ ID NO.1和/SEQ ID NO.2所示。通过本发明的PCR引物进行PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳,利用电泳结果的条带数来确定鸭、鸡、鸽、番鸭、鹅或鹌鹑的性别,具有操作简单方便,鉴别结果快速准确,便于基层推广和使用,具有广阔的市场应用前景,此外,基于本发明方法开发的检测试剂盒,可产生可观的经济效益和良好的社会价值。
一种基于环境DNA宏条形码技术的底栖动物完整性评价方法
本发明公开了一种基于环境DNA宏条形码监测数据,对淡水生态系统的底栖动物进行生物完整性评价方法,属于生物技术领域。本发明基于环境DNA宏条形码监测底栖动物的结果,设计了包含(1)参考点和受损点确定;(2)环境DNA样品采集;(3)eDNA宏条形码生物监测;(4)基于eDNA宏条形码监测的候选生物指标定义及计算;(5)候选指数筛选;(6)选定生物指标计算底栖动物生物完整性得分,(7)划分健康等级等一系列监测与评价流程,为淡水底栖动物的生态完整性评价提供了完整且易于操作的指导,可广泛应用于溪流、河流、湖泊和水库等淡水生态系统的底栖动物完整性评价和水生态健康状况评估。