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一种反转录多重套式PCR检测引物
本发明属于基因型检测技术领域,公开了一种反转录多重套式PCR检测引物,引物包括两条外引物和三条内引物,外引物扩增YHV-1和YHV-8的目的基因,产生目的条带;三条内引物搭配分别特异性的扩增YHV-1和YHV-8,产生两种目的条带。本发明可灵敏的检测黄头病毒的致病基因型YHV-1和YHV-8,并通过产物大小鉴别两种基因型,用于制备上述病毒的鉴别、检测、监测等所需的反转录多重套式PCR的试剂或试剂盒,为该病毒的临床检测和流行病学研究提供了简便、可靠的技术支持。
一种毛霉菌分型检测的引物探针组合及其应用
本发明提供了一种毛霉菌分型检测的引物探针组合及其应用,所述毛霉菌分型检测的引物探针组合包括扩增并检测根霉属的引物对和探针、扩增并检测毛霉属的引物对和探针、扩增并检测犁头霉属的引物对和探针、扩增并检测根毛霉属的引物对和探针、扩增并检测小克银汉霉属的引物对和探针中的任意一种或至少两种的组合;所述毛霉菌分型检测的引物探针组合的检测位点位于28SrRNA序列区域和/或ITS2rRNA序列区域。本发明还提供了一种毛霉菌分型检测的试剂盒及其以非疾病诊断和/或治疗为目的的使用方法以及一种毛霉菌分型检测的装置。所述引物探针组合具有良好的特异性与灵敏度,检测结果准确,应用价值极高。
用于检测福氏志贺菌2a和Xv血清型的LAMP引物及检测方法
本发明提供一种用于检测福氏志贺菌2a和Xv血清型的LAMP引物及检测方法。本发明根据福氏志贺菌主要血清型2a和Xv的型特异性抗原决定簇和群特异性抗原决定簇基因设计LAMP引物,其中2a血清型为(gtrII和wzx基因阳性,gtrX和opt基因阴性),Xv血清型为(gtrX、opt和wzx基因阳性,gtrII基因阴性)。本方法不需要昂贵的设备和仪器,可以快速、准确、特异的检测福氏志贺菌2a和Xv血清型。
Pgk1作为靶点在制备或筛选治疗胃肠道疾病药物中的应用
本发明属于生物医药领域,具体涉及一种Pgk1作为靶点在制备或筛选治疗胃肠道疾病药物中的应用。本发明首先构建了表达Pgk1的重组益生菌,所述重组益生菌能够有效抑制细胞死亡、增强改善黏膜完整度、促进组织形态改善,对消化性溃疡和炎症性肠病的疗效显著,且效果高于临床药物;其次,本发明发现,激活Pgk1的药物能够有效的抑制细胞死亡、增强改善黏膜完整度、促进组织形态改善,对消化性溃疡和炎症性肠病的疗效显著;最后发现,喹唑啉衍生物能够激活Pgk1,有效的改善黏膜完整度、促进组织形态改善、恢复动物体重,对消化性溃疡病和炎症性肠病疗效显著,比现有临床药物活性高20-80倍,具有良好的临床应用前景。
一种利用灰霉菌检测辣椒素含量的方法
本发明提供了一种利用灰霉菌检测辣椒素含量的方法,涉及食品检测技术领域。本发明所述利用灰霉菌检测辣椒素含量的方法,包括:将灰霉菌接种于含有不同浓度辣椒素的V8培养基中,建立辣椒素浓度和灰霉菌斑直径的线性标准曲线y=-1.699x+49.44,其中y为辣椒素浓度,x为灰霉菌斑直径;提取待测样品中的辣椒素,制备待测液;将所述灰霉菌接种于含有所述待测液的V8培养基中进行培养,根据培养时间内待测灰霉菌斑直径和线性标准曲线,计算待测样品中辣椒素的含量。本发明测定辣椒素含量的方法,不仅低成本、操作简便、经济实用,还具有精确度高的特点。
一种高价值活性寡肽的制备方法
本发明公开了一种高价值活性寡肽的制备方法,属于涉及食品、药品淀粉糖生产领域。本发明以玉米黄粉为原料制备玉米蛋白,利用纳豆芽孢杆菌的发酵产物酶解玉米蛋白制备得到可用于米曲霉发酵的培养基,将米曲霉在培养基中发酵,发酵后得到的发酵液经活性炭吸附脱芳后得到寡肽,其中小于1000Da的寡肽大于85%,F值大于22,寡肽含量为9.43g·L~(-1),寡肽占比86%。充分利用了玉米黄粉,并且制备得到了高F值寡肽,具备广阔的应用前景。
一种生物法生产L-5-甲基四氢叶酸的方法
本发明公开了一种生物法生产L-5-甲基四氢叶酸(L-5-MTHF)的方法,是在大肠杆菌中敲除了分解代谢途径中的甲硫氨酸合成酶基因(metH),并引入了一条新的产L-5-MTHF的代谢途径构建了产L-5-MTHF的工程菌BL21-WL菌株或BL21(ΔmetH)-C1T菌株,通过对所构建的工程菌产L-5-MTHF的发酵条件优化,所述工程菌最大细胞干重产量可达445.94μg·g~(-1),比优化前提高了99.71%,达到出发菌株的10.0倍,换算为每升培养物的产量后可达1249.11μg,远大于目前报道中的以E.coli为宿主菌的L-5-MTHF产量(119.84μg·L~(-1))。预示本发明方法及构建的工程菌具有极大的应用价值和市场前景。
一种共培养促进红曲菌生产黄色素的方法
本发明公开了一种共培养促进红曲菌生产黄色素的方法,属于微生物发酵技术领域。本发明通过在红曲菌发酵初期添加微生物发酵液,促进红曲菌菌体量增加及红曲色素合成。该方法操作简单,且不会改变色素的结构,仅通过较低的附加投入,就可以提高红曲黄色素的合成,使红曲黄色素的色价达到535U/mL,具有重大的经济效益。
一种生产十一烷基灵菌红素的培养基及方法
本发明公开了一种生产十一烷基灵菌红素的培养基及方法,该方法以胶原多肽作为十一烷基灵菌红素发酵生产的前体来源,涉及生物质转化和微生物发酵技术领域。胶原多肽的重均分子量为0.2k Da-20k Da,上述重均分子量的胶原多肽可以促进链霉菌的生长,并诱导和刺激十一烷基灵菌红素的生产,大幅缩短发酵时间,提高发酵效率。胶原多肽比黄豆粉和麦芽浸粉更适合链霉菌发酵生产十一烷基灵菌红素。兔、牛、鸡和鸭肉蛋白多肽中前体氨基酸的含量高于黄豆粉和麦芽浸粉,低于胶原多肽,因此虽然这4种肉蛋白多肽可产十一烷基灵菌红素,但与胶原多肽相比,其发酵时间大幅延长,且产量也相对较低。可见,胶原多肽在十一烷基灵菌红素的发酵生产中具有很好的应用前景。
一种将L-色氨酸转化为色胺和D-色氨酸的方法
本发明公开了一种将L-色氨酸转化为色胺和D-色氨酸的方法,包括以下步骤:(1)对L-色氨酸进行消旋处理,获得含有D-色氨酸和L-色氨酸的母液;(2)向母液中投入色氨酸脱羧酶和辅酶PLP,在40-50℃、pH6.0±0.5的条件下特异性催化L-色氨酸转化成色胺;当母液中L-色氨酸含量降至0.001g/L或0.001g/L以下时结束反应,获得含有D-色氨酸和色胺的反应液;(3)调节反应液的pH值至12.0,使反应液中的色胺析出形成沉淀,分离得到色胺;(4)向分离出色胺后的反应液中加盐酸,使D-色氨酸析出,分离得到D-色氨酸。采用本发的方法可以将低价值的L-色氨酸同时转化为高价值的色胺和D-色氨酸;L-色氨酸的转化效率高,转化得到的色胺和D-色氨酸的纯度高。