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最新技术
一种骨骼组织单细胞悬液的制备方法
本发明公开了一种骨骼组织单细胞悬液的制备方法,1)配制试剂与培养基,2)组织预处理,3)组织初步消化解离,4)组织二次彻底消化,5)μm细胞过滤器过滤,6)获取目的组织单细胞悬液;7)测活细胞得率,本发明制备骨骼组织单细胞悬液的方法,能够实现低成本、快速、高效获得骨骼组织单细胞悬液,并保证解离的细胞保持良好活力,可应用于大范围的动物骨骼细胞的解离、分离纯化以及细胞系的建立,为动物单细胞、基因功能及遗传育种研究提供重要参考资料。
一种酶分消化结合组织块培养分离成骨细胞的方法
本发明提供一种酶分消化结合组织块培养分离成骨细胞的方法,包括以下步骤包括以下步骤:S1、前期准备:取七日龄以内的颅骨组织,清洗后将颅骨组织剪碎成组织块;S2、酶分消化:将组织块置于离心管中,通过胰蛋白酶和I型胶原酶分步对组织块进行消化,直至组织块松散成胡絮状;S3、细胞培养:向离心管内加入培养液后静置,每隔1-3天采取半换液方式进行换液,直至细胞从组织块周边生长出来,再更换培养液并废弃组织块;S4、细胞纯化:通过差速贴壁法去除步骤S3中离心管中的成纤维细胞,即可得到纯化的成骨细胞。本发明使用的培养方法使分离的成骨细胞的细胞纯度相比于对比例大幅度得到提升,且同时细胞培养所需的时间也大大缩短。
一种GV期冷冻卵母细胞解冻后体外成熟培养液及其应用
本发明涉及一种GV期冷冻卵母细胞解冻后体外成熟培养液及其应用,本发明提出的GV期冷冻卵母细胞解冻后体外成熟培养液,是在M16培养液中添加Nampt激活剂P7C3,所述Nampt激活剂P7C3的添加浓度为0.1-10μM。本发明同时提出一种改善GV期冷冻卵母细胞解冻后体外成熟培养质量的方法。本发明提出的培养液能满足GV期冷冻卵母细胞体外成熟过程中对能量的需求,进而提高卵母细胞内在质量,且其非整倍体比例与新鲜卵母细胞相比无明显差异。
一种改善卵母细胞体外和体内成熟质量的方法与应用
本发明属于生物医药技术领域,涉及一种改善卵母细胞体外和体内成熟质量的方法与应用,通过直接在卵母细胞体外成熟培养液中添加褪黑素,以及使雌性动物摄取褪黑素,证明褪黑素可以缓解氧苯酮诱导的卵母细胞质量下降,表现为提高卵母细胞体外和体内成熟率和早期胚胎的发育率、改善纺锤体形态和线粒体功能、降低卵母细胞内ROS水平、提高GSH水平、抑制早期凋亡水平。本发明提供了改善氧苯酮影响雌性动物卵母细胞质量的方法,为临床上环境因素导致的卵母细胞成熟异常患者的诊治以及动物胚胎的体外生产具有重要意义。
一种对食蟹猴干细胞的无饲养层培养方法
本发明属于生物与新医药技术领域,公开了一种对食蟹猴干细胞的无饲养层培养方法,在饲养层培养的多能干细胞用胶原酶消化后,用无饲养层培养基重旋消化下来的细胞,转移到提前用基质胶包被的培养皿中,放入培养箱中;当细胞密度到培养皿面积的80%-90%,用ACCTUSE酶消化后,按照(1:5)-(1:10)的比例传到提前包被的培养皿中。本发明通过开发新的的培养条件,可以实现食蟹猴多能干细胞在无饲养层条件下的培养,无需饲养层的制备节省大量的人力物力,培养成分明确,可以长期保持食蟹猴多能干细胞的多能性。本发明的无饲养层培养食蟹猴干细胞的方法,无批次检影响,有助于提高实验的准确性,培养体系可被临床借鉴。
一种皮肤抗衰老用胚胎干细胞外泌体的制备方法
本发明公开了一种皮肤抗衰老用胚胎干细胞外泌体的制备方法,涉及生物技术领域,包括以下步骤:S1:将胚胎干细胞接种到扩增培养基进行培养;S2:收集胚胎干细胞培养基,离心去除细胞碎片,过滤去除大颗粒,得到胚胎干细胞培养上清;S3:用切向流超滤膜浓缩胚胎干细胞培养上清,得到外泌体浓缩液;S4:对外泌体浓缩液进行过柱处理,去除杂蛋白,得到外泌体悬液。该皮肤抗衰老用胚胎干细胞外泌体的制备方法,本发明优选人胚胎干细胞作为外泌体的来源。胚胎干细胞的外泌体比成体组织干细胞外泌体来源更稳定,功能更强大,能够调控体内干细胞的生长和增殖,促进皮肤内的成纤维细胞等分泌更多的胶原蛋白,这些生物效应具有传统化妆品不可比拟的优势。
一种胎盘干细胞的制备培养方法
本发明公开了一种胎盘干细胞的制备培养方法,包括产妇筛查、样本采集、样本运输、样本交接、样本检测、样本预处理、细胞分离制备、原代培养、传代培养、细胞检测、建立可供检索的细胞信息档案、编码入库并上传细胞信息档案。本发明属于干细胞的分离制备技术领域,具体是指一种可以提高干细胞的安全性,简化操作步骤的胎盘干细胞的制备培养方法。
一种提高克隆胚胎发育质量的添加剂及其应用
本发明公开了一种提高克隆胚胎发育质量的添加剂,通过在体外克隆胚胎培养液中添加IL17D来抑制胚胎细胞的凋亡,进而提高克隆胚胎的发育质量,并应用于提高克隆胚胎发育质量、提高动物克隆技术效率领域、抑制体外培养胚胎细胞凋亡等领域,进而为更广泛地应用于畜牧生产、基因编辑研究等领域服务。
组蛋白H3K79甲基转移酶抑制剂在提高动物圆形精子注射胚胎发育效率中的应用
本发明属于医药领域,公开了组蛋白H3K79甲基转移酶抑制剂在提高动物圆形精子注射胚胎发育效率中的应用。本发明首次公开了组蛋白H3K79甲基转移酶抑制剂在提高动物圆形精子注射胚胎发育效率中的应用,与现有的圆形精子注射技术相比,本发明在不引入转基因风险下,通过组蛋白H3K79甲基转移酶抑制剂可以显著提高圆形精子注射胚胎的囊胚发育率,建立了良好的圆形精子注射胚胎体外培养体系,提高圆形精子注射技术的可行性。
一种用于体外自组装血管化的复合支架及其制备方法和应用
本发明提供了一种用于体外自组装血管化的复合支架及其制备方法和应用,属于组织工程学技术领域。本发明提供的复合支架以聚乙烯醇水凝胶作为外部支架,利用聚乙烯醇水凝胶优异的机械性能、低降解率和低溶胀率,使得灌输通道能够在长期灌输培养液的状态下保持完整性,并支撑内部支架不变形,同时维持生成血管的形态;具有交联网络结构的内部支架能够进一步维持生长血管的形态;在外部支架和内部支架间设置细胞涂层能够使细胞定向入侵支架内部,从而生成血管化网络。