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抗体功能化的外泌体制剂及其制备方法和应用
本发明提供了一种抗体功能化的外泌体制剂及其制备方法和应用。所述外泌体制剂是以特定的肿瘤抗原Ag激活的树突状细胞的外泌体Exo-Ag为载体,利用磷脂-聚乙二醇-琥珀酰亚胺酯DSPE-PEG-NHS为交联剂,将抗CD3抗体aCD3和抗EGFR抗体aEGFR修饰到外泌体Exo-Ag表面而得到的外泌体制剂Exo-Ag-aCD3/aEGFR。本发明利用功能化的树突细胞外泌体作为中间体,经过肿瘤特异性抗原活化、具有靶向性的CAR-T细胞模拟物的构建,克服了CAR-T疗法中因肿瘤表面抗原的缺失导致的抗性作用,解决了CAR-T疗法中因体外改造、扩增T细胞造成的时间及成本问题。
一种特异性靶向癌种的新抗原制备方法
本发明公开了抗原制备方法技术领域,具体领域为一种特异性靶向癌种的新抗原制备方法,包括1)分析制备精准靶向肿瘤抗原;2)采集、分离培养DC细胞;3)采用精准靶向肿瘤抗原及激活剂制备敏活化DC细胞;4)封闭DC细胞表面分子,收获DC细胞疫苗;利用较少起始数量的外周血单个核细胞来制备精准靶向肿瘤抗原,在体外有效地诱导,扩增精准靶向肿瘤特异性细胞毒T细胞,作为肿瘤患者的临床治疗,对机体干扰性小。本制备方法有效解决DC细胞和细胞毒T体外扩增不足的问题;DC细胞和细胞毒T体外培养中激活的免疫检测点的封闭问题。本制备方法能够有效地在体外和体内诱导精准靶向肿瘤抗原特异性细胞毒T淋巴细胞,并具备对肿瘤细胞高效、特异性杀伤功能。
细胞治疗组合物及其制备方法和作为过敏性反应及自身免疫疾病治疗药物的应用
本发明提供了一种细胞治疗组合物,将I gE(CH-3)DC与CI K细胞共培养得到的I gE(CH-3)DC-CI K细胞,再与同种异体MSC细胞共培养制备得到细胞治疗组合物,本发明还提供了一种上述细胞治疗组合物在制备用于治疗过敏性反应及自身免疫疾病的细胞类药物中的应用。本发明运用I gE(CH-3)DCCI K+MSCs共培养细胞治疗过敏性反应及自身免疫疾病,通过实验证明会产生更为有利的结果,且不具有任何副作用。
一种扩增脐带血来源的NK细胞的培养方法
本发明提供了一种扩增脐带血来源的NK细胞的培养方法,采用灭活的LCL细胞作为滋养细胞,联合细胞因子进行特异性扩增。本申请提供的方法培养的CBMC细胞扩增出的NK细胞纯度相对于扩增前显著升高,活化性受体比率明显升高。且本申请的方法有效的提高的细胞产品的纯度,并且扩增的效率以及对恶行肿瘤细胞杀伤活性明显升高,有很好的临床应用前景。
一种原代脐带间充质干细胞的培养基及其应用
本发明细胞培养技术领域,具体涉及一种原代脐带间充质干细胞的培养基及其应用。本发明采用脐带间充质干细胞上清液和/或银胶菊内酯培养原代细胞,相较于传统组织块贴壁法,能有效缩短原代脐带间充质干细胞的制备时间,且保持其较好的细胞活率、表型及功能。
一种间充质干细胞无血清培养基
本发明属于生物医药领域,涉及一种间充质干细胞无血清培养基。本发明提供的无血清培养基成分包括基础培养基和添加成分,所述添加成分包括JNK通路抑制剂、ERK1/2通路抑制剂、P38MAPK通路抑制剂和氨基乙醇,所述的JNK通路抑制剂包括但不限于SP600125,ERK1/2通路抑制剂包括但不限于PD0325901,P38MAPK通路抑制剂包括SB202190、SB203580和BIRB796中的至少一种。本发明间充质干细胞的培养基,不含有FBS,无异源动物源性成分,降低细胞污染的几率,同时对MSC的扩增起到促进作用。
一种工程化外泌体纳米马达及其制备方法
本发明公开了一种工程化外泌体纳米马达及其制备方法,该工程化外泌体纳米马达由表面巯基化共价键合L-精氨酸的两性离子聚合物或负载L-精氨酸的碗状介孔硅纳米材料作为一氧化氮(NO)驱动基体,并将其用于工程化修饰外泌体。本发明的工程化外泌体纳米马达制备方法简单高效,具有优异的生物相容性、在炎症及活性氧微环境具有主动运动能力,可以有效实现外泌体精准靶向病灶部位、修复受损部位,使得外泌体在作为药物载体实现在病患深处的药物递送,赋予其自主运动能力,在生物医药领域具有广阔的应用前景。
一种脂肪源性干细胞的培养方法
本发明涉及生物干细胞培养技术领域,特别是涉及一种脂肪源性干细胞的培养方法,包括:将脂肪块与消化液震荡消化,吸取上层脂肪细胞液加入培养基中密封离心,再加入培养基吹打细胞,即得脂肪源性干细胞悬液;滴加培养基使得培养瓶的顶部润湿,将脂肪源性干细胞悬液接种至已润湿的培养瓶的顶部,晃动培养瓶使得脂肪源性干细胞悬液与培养瓶的顶部接触,将培养瓶翻转180°,使得脂肪源性干细胞悬液铺到培养瓶的底面,恒温培养,即可。本发明解决了现有技术中组织贴壁法中由于脂肪油滴阻碍细胞贴壁从而导致细胞贴壁率低和细胞提取效率低的问题,利用培养瓶亲油的特性,通过预先在顶部吸附脂肪油滴,提高细胞贴壁率和细胞提取效率。
一种含干细胞外泌体的生物墨水及其制造方法
本发明提供了一种生物墨水及其制造方法,以及使用生物墨水通过3D打印制造的生物支架,该生物墨水包含甲基丙烯酸酐明胶(gelatin methacryloyl,GelMA)、氧化的透明质酸(oxidized hyaluronic acid,OHA)、多巴胺修饰的透明质酸(dopamine conjugated hyaluronic acid,HA-DA)、软骨脱细胞基质、和外泌体。
一种用于治疗骨损伤的生物墨水及其制造方法
本发明提供了一种生物墨水及其制造方法,以及使用生物墨水通过3D打印制造的生物支架,该生物墨水包含明胶或明胶衍生物、透明质酸或透明质酸衍生物、脱细胞基质、和外泌体。