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一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测试剂盒及其临床应用
本发明涉及四种抗人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)抗体及其在检测血液样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白含量的检测试剂盒中的应用。具体地本发明提供了4种鼠抗人NGAL单克隆抗体,及其在胶乳增强免疫比浊检测试剂盒中的应用。本发明制备了多种抗体,并进行配对筛选,获得灵敏度及特异性均能满足需求的抗体组合;同时单克隆抗体来源的抗体组合便于试剂盒原料质量控制,可满足试剂盒性能稳定的要求。对上述抗体组合进行检测体系的调试优化工作,获得操作简便,灵敏度,特异性及相关检测性能均可满足人临床样本检测的胶乳免疫比浊定量检测试剂。
一种快速炎症检测试剂盒
本发明公开了一种快速炎症检测试剂盒。本发明筛选获得特异性识别艰难梭菌GDH抗原单克隆抗体,将所述单克隆抗体标记量子点和其他抗体标记的硝酸纤维素膜制备获得抗体荧光量子点快速检测试纸,同时针对艰难梭菌毒素B的DNA序列进行分析,选取保守区设计RPA引物和探针,并制备成为相应的检测试纸条;将两个检测方法进行组合使用,能够进一步提高检测的准确性,从而及早诊断,利于患者尽快治疗,适于大规模推广使用。
快速检测病毒的试剂盒及其制备方法
本发明公开了一种快速检测病毒的试剂盒及其制备方法。本发明筛选获得特异性识别呼吸道合胞病毒F抗原单克隆抗体,将所述单克隆抗体标记量子点和其他抗体标记的硝酸纤维素膜制备获得抗体荧光量子点快速检测试纸,同时针对呼吸道合胞病毒P蛋白的基因序列进行分析,选取保守区设计RPA引物和探针,并制备成为相应的检测试纸条;将两个检测方法进行组合使用,能够进一步提高检测的准确性,从而及早诊断,利于患者尽快治疗,适于大规模推广使用。
一种抗SARS-CoV-2病毒S1蛋白的禽源单链抗体及其应用
本发明通过噬菌体展示抗体库的筛选公开了一种针对新冠病毒SARS-CoV-2S1蛋白的单克隆抗体禽源单链抗体scFv,该单克隆抗体与SARS-CoV-2的棘突蛋白S1亚基特异性结合。本发明还以此单克隆抗体scFv为基础设计和生成了禽源IgY-scFv抗体的小分子CDR-FR融合模拟肽。本发明基于合成生物学与噬菌体展示技术,将突变导入抗体可变区的超可变区,并将此基因转至大肠杆菌中,从而构建了含有10~6种抗体的合成抗体库;本发明的噬菌体展示抗体库能够筛选获得具有特异性和检测功能的禽源scFv抗体,扩大了生物研究和医学诊断的有力资源;本发明筛选到的具有与新冠病毒S1蛋白高结合力的禽源scFv抗体,可以用于病毒的检测,检测方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,适合大范围推广应用。
一种新型冠状病毒SARS-CoV-2中和性抗体及应用
本发明公开了一种抗体,其能结合至新型冠状病毒SARS-CoV-2的Spike蛋白S1亚基中的RBD区域,从而阻断宿主细胞膜表面受体ACE2与Spike蛋白的结合活性;上述抗体为中和性全人源抗体;其中,上述抗体包括重链VH和轻链VL,所述VH和VL均具有可变区CDR1、CDR2和CDR3。本发明还涉及上述抗体的相关应用,具体为制备完整IgG抗体、亲和力成熟抗体,并将相应抗体应用于治疗和/或预防新型冠状病毒SARS-CoV-2。本发明筛选所获得的全人源化scFv单链抗体及其IgG抗体能够识别并结合Spike蛋白的RBD区域,且能有效阻断ACE2与Spike蛋白的结合活性,对细胞无毒性,能显著抑制病毒感染所致的细胞病变效应,且亲和力成熟后抗体的亲和力及对Spike蛋白与ACE2的阻断效果均明显增强。
一种抗非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体的制备方法及应用
一种抗非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体的制备方法及应用,p54-H22细胞作为免疫原和p54-293T细胞作为检测原,所述的p54-H22细胞用的实验物为雌性Balb/c小鼠,所述的雌性Balb/c小鼠三免一周后采用IPMA方法测定,融合后的细胞的培养基与p54-293T细胞做IPMA检测筛选阳性杂交瘤细胞株,经三次亚克隆后获得了10株能够稳定分泌抗ASFV p54蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用p54-H22细胞的雌性Balb/c小鼠制备单抗。采用以上结构后,本发明具有如下优点:1、本实验中,用全细胞免疫小鼠,小鼠的IPMA效价达到较高水平,筛选到的抗体特异性高,杂交瘤筛选效果也较明显;2、小鼠血清IPMA效价可达1:25600,细胞融合后,最终通过IPMA法筛选出10株单克隆抗体,多株单克隆抗体使得实验数据更加准确可靠。
一种鳕鱼皮胶原蛋白肽铜螯合物的制备方法
本发明公开了一种一种鳕鱼皮胶原蛋白肽铜螯合物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:称取一定量的鳕鱼皮胶原蛋白肽和硫酸铜,置于烧杯中,加入100ml的蒸馏水,充分混合溶解,进行水浴加热;本发明所述方法制备的鳕鱼皮胶原蛋白肽铜螯合物,工艺方法简单,环境污染少,可获得良好的经济效益与社会效益,促进海洋水产品深加工产业的发展。
一种从人胎盘中提取纯化I型胶原蛋白的优化方法
本发明提供一种从人胎盘中提取纯化I型胶原蛋白的优化方法,包括以下步骤:步骤(1).原料预处理;步骤(2).碱浸泡:使组织充分溶胀、除去脂质及病毒灭活;步骤(3).酸浸泡:使抗原钝化及去除酸溶性杂蛋白成分;步骤(4).酶解;步骤(5).超滤浓缩更换缓冲;步骤(6).阴离子交换层析;步骤(7).超滤浓缩更换缓冲;步骤(8).盐析:分离纯化I型胶原蛋白;步骤(9).透析:除盐,使其维持在生理盐平衡状态,即得高纯度I型胶原蛋白。本发明的方法可以显著提高产能,而且易于放大生产,同时,耗时缩短、纯度高,易于形成产品,应用领域更广泛。
一种索马鲁肽的固相合成方法
本发明公开了一种索马鲁肽的固相合成方法,其包括:(1)将Gly与树脂偶联,得到Fmoc-Gly-树脂;(2)使用Fmoc-Gly-树脂,按照索马鲁肽序列从C端到N端的顺序依次偶联其余氨基酸,得到索马鲁肽主链-树脂;(3)脱除索马鲁肽主链中Lys~(26)的侧链保护基,然后在Lys~(26)上偶联索马鲁肽的侧链,得到索马鲁肽-树脂;和(4)将索马鲁肽-树脂裂解,纯化即得索马鲁肽。本发明提供一种简便、高效的索马鲁肽制备方法,解决目前索马鲁肽制备工艺繁琐、效率低或成本高的问题。
旋毛虫病的特异性检测抗原及其应用
本发明公开了一种旋毛虫病的特异性检测抗原及其应用。该抗原蛋白质,如下(a1)或(a2)的蛋白质:(a1)氨基酸序列如SEQ ID.1所示的蛋白质;(a2)将(a1)限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加,且可与绵羊旋毛虫病血清抗体特异性结合的蛋白质。本发明旋毛虫病的特异性检测抗原及其应用,首次将检测时间提前至48h,操作简便、敏感性和准确性良好;本发明建立的方法具有良好的特异性,为流行病学调查和疾病的诊断提供了一种快速的诊断方法,可同时检测感染旋毛虫成虫期、新生幼虫期、肌肉幼虫期不同时期的血清。