本发明涉及一种抗菌肽LL37活性中心衍生肽二倍体抗菌肽LG及其制备方法和应用,LL37的17-29氨基酸残基FD是其活性中心。抗菌肽LG序列如序列表SEQ ID No.1所示。以解决FD抗菌活性不高,并且存在盐离子的环境下导致抗菌活性有较大降低的问题。制备方法是:将FD的衍生肽FR,通过直接连接、刚性连接肽AEAAAKA连接和柔性连接肽GGGGS连接的设计,获得三种二倍体并以“选择指数”作为评价指标进行筛选,本发明得到的抗菌肽LG与原活性中心片段FD相比,抗菌活性提升了近20倍;抗菌肽LG与衍生肽FR相比,抑菌活性提升了约3倍,具有更好的盐离子稳定性,具有开发成新型抗菌药物的潜力。