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最新技术
能够用于培养PRRSV获得高病毒含量病毒液的Marc-145细胞株的筛选方法
本发明公开一种能够用于培养PRRSV获得高病毒含量病毒液的Marc-145细胞株的筛选方法,属于生物工程技术领域。本发明提供的方法包括利用间接免疫荧光法检测由候选Marc-145单克隆细胞株繁殖形成的Marc-145单克隆细胞群中细胞表面存在CD163受体的细胞占Marc-145细胞群的百分比,再根据该百分比筛选出能够用于培养PRRSV获得高病毒含量病毒液的Marc-145细胞株,具有快速、方便、客观、准确的优势,还能够基于此预测由Marc-145细胞群培养PRRSV获得的病毒液中病毒含量,可以指导疫苗生产。
一种制备人肾脏组织单细胞悬液的消化酶及应用
本发明提供一种用于临床高效制备人肾脏组织单细胞悬液的消化酶及应用,所述消化酶包含ColⅡ、ColIV、ColⅠ、DNaseⅠ和透明质酸酶。通过该消化酶对肾脏组织进行酶解消化,具有单细胞占比高、细胞数多以及细胞活性高等优势。
胃癌原代细胞的培养基及培养方法
本发明提供了一种实现胃癌原代细胞体外快速扩增的培养基和培养方法。本发明的胃癌原代细胞培养基包含初始培养基、Rho蛋白酶抑制剂、抗生素、胰岛素、非必需氨基酸、氢化可的松、霍乱毒素、谷氨酰胺、胎牛血清、以及选自B27添加剂和N2添加剂中的至少一种的添加剂。通过使用本发明的胃癌原代细胞培养基,采用条件重编程的培养技术,能够实现胃癌原代细胞的有效快速扩增,这样扩增得到的细胞保持了病人的病理特性,提高了胃癌原代细胞的培养成功率和细胞扩增速率,可以为患者的个性化治疗提供研究基础。
一种分离内耳FZD10阳性胶质细胞的方法
本发明涉及细胞分离和纯化领域,具体涉及一种分离内耳FZD10阳性胶质细胞的方法。本申请利用转基因鼠杂交使得内耳中的FZD10阳性胶质细胞获得荧光标记,从而便于后续通过流式分选获取纯化的内耳胶质细胞。本发明所采用的分离纯化技术能够最大限度的获取胶质细胞并保持细胞的活性,分选后FZD10阳性胶质细胞纯度达到98%以上,能够满足后续实验的需要,且分析纯化过程简洁快速,非常适用于后续实验研究。
抗体功能化的外泌体制剂及其制备方法和应用
本发明提供了一种抗体功能化的外泌体制剂及其制备方法和应用。所述外泌体制剂是以特定的肿瘤抗原Ag激活的树突状细胞的外泌体Exo-Ag为载体,利用磷脂-聚乙二醇-琥珀酰亚胺酯DSPE-PEG-NHS为交联剂,将抗CD3抗体aCD3和抗EGFR抗体aEGFR修饰到外泌体Exo-Ag表面而得到的外泌体制剂Exo-Ag-aCD3/aEGFR。本发明利用功能化的树突细胞外泌体作为中间体,经过肿瘤特异性抗原活化、具有靶向性的CAR-T细胞模拟物的构建,克服了CAR-T疗法中因肿瘤表面抗原的缺失导致的抗性作用,解决了CAR-T疗法中因体外改造、扩增T细胞造成的时间及成本问题。
一种特异性靶向癌种的新抗原制备方法
本发明公开了抗原制备方法技术领域,具体领域为一种特异性靶向癌种的新抗原制备方法,包括1)分析制备精准靶向肿瘤抗原;2)采集、分离培养DC细胞;3)采用精准靶向肿瘤抗原及激活剂制备敏活化DC细胞;4)封闭DC细胞表面分子,收获DC细胞疫苗;利用较少起始数量的外周血单个核细胞来制备精准靶向肿瘤抗原,在体外有效地诱导,扩增精准靶向肿瘤特异性细胞毒T细胞,作为肿瘤患者的临床治疗,对机体干扰性小。本制备方法有效解决DC细胞和细胞毒T体外扩增不足的问题;DC细胞和细胞毒T体外培养中激活的免疫检测点的封闭问题。本制备方法能够有效地在体外和体内诱导精准靶向肿瘤抗原特异性细胞毒T淋巴细胞,并具备对肿瘤细胞高效、特异性杀伤功能。
细胞治疗组合物及其制备方法和作为过敏性反应及自身免疫疾病治疗药物的应用
本发明提供了一种细胞治疗组合物,将I gE(CH-3)DC与CI K细胞共培养得到的I gE(CH-3)DC-CI K细胞,再与同种异体MSC细胞共培养制备得到细胞治疗组合物,本发明还提供了一种上述细胞治疗组合物在制备用于治疗过敏性反应及自身免疫疾病的细胞类药物中的应用。本发明运用I gE(CH-3)DCCI K+MSCs共培养细胞治疗过敏性反应及自身免疫疾病,通过实验证明会产生更为有利的结果,且不具有任何副作用。
一种扩增脐带血来源的NK细胞的培养方法
本发明提供了一种扩增脐带血来源的NK细胞的培养方法,采用灭活的LCL细胞作为滋养细胞,联合细胞因子进行特异性扩增。本申请提供的方法培养的CBMC细胞扩增出的NK细胞纯度相对于扩增前显著升高,活化性受体比率明显升高。且本申请的方法有效的提高的细胞产品的纯度,并且扩增的效率以及对恶行肿瘤细胞杀伤活性明显升高,有很好的临床应用前景。
一种原代脐带间充质干细胞的培养基及其应用
本发明细胞培养技术领域,具体涉及一种原代脐带间充质干细胞的培养基及其应用。本发明采用脐带间充质干细胞上清液和/或银胶菊内酯培养原代细胞,相较于传统组织块贴壁法,能有效缩短原代脐带间充质干细胞的制备时间,且保持其较好的细胞活率、表型及功能。
一种间充质干细胞无血清培养基
本发明属于生物医药领域,涉及一种间充质干细胞无血清培养基。本发明提供的无血清培养基成分包括基础培养基和添加成分,所述添加成分包括JNK通路抑制剂、ERK1/2通路抑制剂、P38MAPK通路抑制剂和氨基乙醇,所述的JNK通路抑制剂包括但不限于SP600125,ERK1/2通路抑制剂包括但不限于PD0325901,P38MAPK通路抑制剂包括SB202190、SB203580和BIRB796中的至少一种。本发明间充质干细胞的培养基,不含有FBS,无异源动物源性成分,降低细胞污染的几率,同时对MSC的扩增起到促进作用。