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一种制备人肾脏组织单细胞悬液的消化酶及应用
本发明提供一种用于临床高效制备人肾脏组织单细胞悬液的消化酶及应用,所述消化酶包含ColⅡ、ColIV、ColⅠ、DNaseⅠ和透明质酸酶。通过该消化酶对肾脏组织进行酶解消化,具有单细胞占比高、细胞数多以及细胞活性高等优势。
一种融合蛋白、碱基编辑工具及其应用
本发明公开了一种融合蛋白、碱基编辑工具及其应用,所述融合蛋白基于中华链球菌来源的Cas9同源物的新型胞嘧啶单碱基编辑工具,包括经过密码子优化的Cas9nickase同源蛋白与脱氨酶APOBEC1、尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂(UGI)融合蛋白构成的碱基编辑器;以及含有上述融合蛋白的基因编辑工具或细胞表达系统及其应用。所述融合蛋白可以识别NHAAAA作为PAM,可编辑窗口为gRNA靶向序列范围内3-12位的胞嘧啶(C)。可实现特定碱基(C-to-T)的转变,拓宽了碱基编辑的靶向范围和应用范围。