具体实施方式

实施例1

土壤菌悬液的制备和菌株分离：将样本土样过100目的筛，除去大块沙土，称取土样10g，加入装有90mL无菌水，摇床30min左右，使得土壤中的微生物与水样混合均匀，配置土壤悬液的浓度为0.1g/L，在超净工作台中取土壤悬液进行浓度梯度稀释，用灭菌枪头吸取1mL的0.1g/L土壤悬液，加入到9mL的无菌水中，如此稀释10^-6。

重金属铜的梯度平板配置：配制200mL的LB固体培养基，同时再将适量的重金属分别加入配置好的100mL液体培养基中，再加入1.2g的琼脂，121℃，灭菌20min。灭菌完成后，一般先将培养皿一侧搁高约5mm，倒入约10mL融化的不含金属离子的培养基，待凝固后放回水平位置，再倒上等体积含金属离子的培养基，放置一天后，即成重金属梯度平板。

吸取1mL的土悬液加入重金属梯度平板，进行涂布，37℃培养24-48h，观察菌落的生长情况，在重金属浓度较高处挑选出菌落形态不同，生长良好的菌落，于含有重金属的LB固体培养基上进行划线分离纯化，一直到筛选到菌落特征一致的单一菌落；

将上述所得到的单一菌落转接至LB斜面培养基，37℃培养箱中培养24h，将所有的斜面试管取出，放于4℃冰箱中保存备用。选取分离、纯化后所得的斜面菌种，分别接种于不同重金属(Cu、Cr、Cd、Pb和Zn)的LB液体培养基中，将在上述含有重金属LB培养基中生长良好的菌株定为初选菌株。

将初选菌株的培养液进行离心，测定上清液中重金属的浓度(如图1所示)，发现LQCu菌株的沉淀效率都在85％以上。

本实施例假单胞菌于2021年4月23日在中国微生物菌种保藏管委会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.22233，经鉴定为台湾假单胞菌(Pseudomonas taiwanensis)。该菌株筛选自刁泉铜尾矿区土壤中，该菌株杆状，周生鞭毛，能运动，革兰氏阳性菌。菌落表面粗糙不透明，微黄色，需氧菌。其最适生长条件为：pH 7.2-7.5，温度30-35℃。

实施例2

不同剂型对台湾假单胞菌对土壤重金属修复效果的影响

将驯化得到的高效沉淀固化重金属的台湾假单胞菌(Pseudomonas taiwanensis)LQCu在活化培养基中进行扩繁，分别用高岭土、白炭黑和硅藻土来做可湿性粉剂(台湾假单胞菌数量为1012/g)，可湿性粉剂每亩喷洒1kg，结果如图2所示，土壤中Cu、Cr、Cd、Pb和Zn水浸出的重金属浓度降低了10％左右。

用鸡粪、玉米秸秆和草炭土制备有机菌剂(台湾假单胞菌数量为1011/g)，每亩有机菌剂施用量5kg。结果如图3所示，以鸡粪为载体的有机菌剂施用后，土壤中Cr、Cd、Pb和Zn水浸出的重金属浓度降低了35％左右，而浸出Cu含量基本没有差别；而秸秆和草炭土为载体的有机菌剂施用后，土壤中Cu、Cr、Cd、Pb和Zn水浸出的重金属浓度降低了75％左右，其中草炭土降低了78％左右，考虑到材料的适宜性，秸秆作为了有机载体。

实施例3

秸秆类型和大小对台湾假单胞菌对土壤重金属修复效果的影响

分别选用本地常用秸秆，玉米、高粱和小麦秸秆作为载体，并粉碎成2、5、8和10mm的长度秸秆作为载体，制备的菌剂中台湾假单胞菌数量为1011/g，每亩施用量仍为5kg。结果如图4所示，发现秸秆类型不会影响菌剂的修复效果，秸秆长度大小会影响菌剂对重金属的沉淀效果，其中2mm和5mm的制备菌剂，土壤中Cu、Cr、Cd、Pb和Zn水浸出的重金属浓度可降低75％，而8mm和10mm的菌剂土壤中Cu、Cr、Cd、Pb和Zn水浸出的重金属浓度可降低63％左右。

实例例4

台湾假单胞菌剂对植物种子和蔬菜中重金属的影响

在太原市某污灌区的农田中施用2mm秸秆制备的菌剂，菌剂中单胞菌数量为1011/g，每亩施用量仍为5kg，以不施菌剂的为对照。分别种植玉米和白菜，分别测定玉米种子和白菜叶子的Cu、Cr、Cd、Pb和Zn含量(如表1所示)，对照样地中白菜叶子的Cu(1.5mg/kg)、Cr(0.07mg/kg)、Cd(0.04mg/kg)、Pb(0.04mg/kg)和Zn(6.5mg/kg)，而施用菌剂的样地中白菜叶子的Cu(0.35mg/kg)、Cr(0.01mg/kg)、Cd(0.003mg/kg)、Pb(0.003mg/kg)和Zn(2.5mg/kg)。

对照样地中玉米种子的Cu(3.2mg/kg)、Cr(0.09mg/kg)、Cd(0.007mg/kg)、Pb(0.03mg/kg)和Zn(12.1mg/kg)，而施用菌剂的样地中玉米种子的Cu(0.95mg/kg)、Cr(0.01mg/kg)、Cd(0.002mg/kg)、Pb(0.006mg/kg)和Zn(3.6mg/kg)。

表1在对照和加菌剂的样地中白菜叶子和玉米种子中重金属含量(mg/kg)