本发明公开了一种人源诱导肝向分化干细胞的制备方法及其应用,所述方法包括将人源诱导多能干细胞(human induced pleuripotent stem cell,hiPSC)接种在matrigel包被的六孔细胞培养皿上,用mTeSR~(TM)1干细胞培养液进行培养。待干细胞生长克隆明显时,向干细胞培养液中加入激活素A(activin A)处理所述人iPS干细胞进行内胚层的诱导分化,得到内胚层细胞;然后将所述内胚层细胞在含有骨形成蛋白4(Bone morphogenetic protein-4,BMP-4)和成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF-2)的RPMI+B-(27)培养基中培养,使得所述内胚层细胞定向分化,得到肝向分化干细胞。干细胞肝向分化移植方法减少肝向分化时间,增强干细胞在α-1抗胰蛋白酶缺乏症转基因小鼠肝脏体内的再生能力和成熟度,减少费用,该技术在临床应用具有广阔的前景。