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最新技术
胆管癌胆汁外泌体的提取方法
本发明公开了胆管癌胆汁外泌体的提取方法,包括步骤一:标本的采集;步骤二:外泌体的提取:离心前一天,胆汁标本从冰箱取出置于4度冰箱融化,得到50ml黄色胆汁;胆汁以4°、300g、5min离心1次,然后取上清液;上清以4°、2000g、10min离心1次,然后取上清;得到的50mL上清液稀释至60mL,以4°、12500g、离心30min,离心结束后取上清液;得到的胆汁上清液稀释至70mL,过0.22um筛子后,以4°、120000g、离心2h,得到底部沉淀,将该沉淀用无菌D-PBS反复吹打溶解后转移至EP管中,共得到200uL外泌体悬液,NTA检测后置于-80°冰箱中保存;步骤三:外泌体的鉴定。通过标本的采集、外泌体的提取、外泌体的鉴定,进而能够实现对胆管癌胆汁外泌体的提取,在临床诊疗中有巨大的潜在应用价值。
胃癌原代细胞的培养基及培养方法
本发明提供了一种实现胃癌原代细胞体外快速扩增的培养基和培养方法。本发明的胃癌原代细胞培养基包含初始培养基、Rho蛋白酶抑制剂、抗生素、胰岛素、非必需氨基酸、氢化可的松、霍乱毒素、谷氨酰胺、胎牛血清、以及选自B27添加剂和N2添加剂中的至少一种的添加剂。通过使用本发明的胃癌原代细胞培养基,采用条件重编程的培养技术,能够实现胃癌原代细胞的有效快速扩增,这样扩增得到的细胞保持了病人的病理特性,提高了胃癌原代细胞的培养成功率和细胞扩增速率,可以为患者的个性化治疗提供研究基础。
一种工程化外泌体纳米马达及其制备方法
本发明公开了一种工程化外泌体纳米马达及其制备方法,该工程化外泌体纳米马达由表面巯基化共价键合L-精氨酸的两性离子聚合物或负载L-精氨酸的碗状介孔硅纳米材料作为一氧化氮(NO)驱动基体,并将其用于工程化修饰外泌体。本发明的工程化外泌体纳米马达制备方法简单高效,具有优异的生物相容性、在炎症及活性氧微环境具有主动运动能力,可以有效实现外泌体精准靶向病灶部位、修复受损部位,使得外泌体在作为药物载体实现在病患深处的药物递送,赋予其自主运动能力,在生物医药领域具有广阔的应用前景。