本发明涉及生物检测技术领域,特别涉及一种稳定产生牛病毒性腹泻病毒抗原的细胞系及抗体胶体金检测试纸条的制备方法。该细胞系按照以下方法制备:将牛病毒性腹泻病毒接种于敏感细胞系,通过有限稀释法筛选持续性感染细胞,进行克隆纯化和病毒滴度测定,确定滴度高于10~7-.~0TCID-(50)的细胞建系。本发明制备了可以持续稳定产生牛病毒性腹泻病毒抗原的细胞系,应用该细胞系不需要再接种毒种,按照正常细胞传代,既可节约毒种用量,又避免操作复杂易造成污染等问题,节省人力物力。本发明的牛病毒性腹泻病毒抗体胶体金检测试纸条具有特异性强、灵敏度高、简单快速、操作简单快捷等特点,易于推广,适用于基层养殖场检测,具有广阔的市场前景。