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一种对食蟹猴干细胞的无饲养层培养方法
本发明属于生物与新医药技术领域,公开了一种对食蟹猴干细胞的无饲养层培养方法,在饲养层培养的多能干细胞用胶原酶消化后,用无饲养层培养基重旋消化下来的细胞,转移到提前用基质胶包被的培养皿中,放入培养箱中;当细胞密度到培养皿面积的80%-90%,用ACCTUSE酶消化后,按照(1:5)-(1:10)的比例传到提前包被的培养皿中。本发明通过开发新的的培养条件,可以实现食蟹猴多能干细胞在无饲养层条件下的培养,无需饲养层的制备节省大量的人力物力,培养成分明确,可以长期保持食蟹猴多能干细胞的多能性。本发明的无饲养层培养食蟹猴干细胞的方法,无批次检影响,有助于提高实验的准确性,培养体系可被临床借鉴。
一种皮肤抗衰老用胚胎干细胞外泌体的制备方法
本发明公开了一种皮肤抗衰老用胚胎干细胞外泌体的制备方法,涉及生物技术领域,包括以下步骤:S1:将胚胎干细胞接种到扩增培养基进行培养;S2:收集胚胎干细胞培养基,离心去除细胞碎片,过滤去除大颗粒,得到胚胎干细胞培养上清;S3:用切向流超滤膜浓缩胚胎干细胞培养上清,得到外泌体浓缩液;S4:对外泌体浓缩液进行过柱处理,去除杂蛋白,得到外泌体悬液。该皮肤抗衰老用胚胎干细胞外泌体的制备方法,本发明优选人胚胎干细胞作为外泌体的来源。胚胎干细胞的外泌体比成体组织干细胞外泌体来源更稳定,功能更强大,能够调控体内干细胞的生长和增殖,促进皮肤内的成纤维细胞等分泌更多的胶原蛋白,这些生物效应具有传统化妆品不可比拟的优势。