本发明涉及一种刺齿凤尾蕨中的化合物及其提取分离纯化方法和应用,所述化合物分别为:7β,9-dihydroxy-15-oxo-ent-kauran-16-en-19,6β-olide、5,11β,12β-trihydoroxy-15-oxo-ent-kuar-16-en-19-oic acid、11β-hydroxy-15-oxo-ent-kauran-16-en-19-oic acid、7α,11α-二羟基-15-氧-16-亚甲基-对映贝壳杉烷-19,6β-内酯、9-hydroxy-15-oxo-ent-kauran-16-en-19-oic acid。对本发明化合物进行抗肿瘤活性筛选,结果表明所述5个化合物对白血病HL-60、肺癌A549、肝癌SMMC-7721、乳腺癌MCF-7和结肠癌SW480的体外肿瘤生长有半数抑制活性,为继续加强对该种植物的化学成分和活性筛选研究以及对该种植物中具有较好活性的化合物进行结构修饰方面的研究提供参考。