一种鉴定甜瓜性别的引物和方法及其应用
技术领域
本发明属于分子生物学领域,具体涉及一种鉴定甜瓜性别的引物和方法及其应用。
背景技术
甜瓜(2n=24)(Cucumis melo L.)属于葫芦科(Cucurbitaceae)甜瓜属(Cucumis)蔓生草本植物,食用果实类的一种。甜瓜的品质风味独特,是餐后的最佳果品之一。随着经济的发展和人民生活水平的提高,国内外对甜瓜的需求量日益增加。大多数甜瓜品种为雄全同株类型(雄花、完全花同株),即植株上有单性的雄花和两性花,其中能结果的是两性花。两性花本身有雄蕊也有雌蕊,要获得高纯度的杂交一代种子,必须人工将两性花中的雄蕊去除,以其它优良品种的花粉为其人工授粉,但是授粉过程耗费大量的人力物力,而且对甜瓜的品质及产量都产生巨大的影响。甜瓜作为高产高效的重要经济作物之一,利用雌性系育种一直是保护地栽培用种主要的育种目标之一。在制种过程中,省去了人工授粉的过程,不仅能够高产优质,而且还能节约成本。因此,研究甜瓜性别遗传规律及产生机理对指导甜瓜育种实践具有重要的意义。现有技术检测效率不高,准确度不高。
鉴于甜瓜植株开花和种子生产特性,在育种与繁种人工成本不断升高的现在,如何在降低人工成本的前提下保证F1代杂交种生产的纯度一直是种业界关注的热点和追求的目标。现有技术的缺陷:在PCR技术发明几年后的1988年,等位基因特异扩增(ASP)/扩增受阻突变体系(Amplification refractory mutation system,ARMS)技术出现。该技术原理简单,即利用引物3’最后1~4个尤其是最后1个碱基的差异,区分并特异扩增特定等位基因DNA片段。天然DNA聚合酶对3’最后几个碱基的复性匹配/错配选择并不好,早期应用该技术须有额外的手段保证选择性。如在引物末端人为引入新错配,或者调整PCR退火温度,但这些手段相对复杂且有稳定性问题,一直困扰着这个原理最简单的SNP分型技术,因而应用并不广泛。
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