一种水中氟嘧菌酯及其代谢物的测定方法
技术领域
本发明涉及物质检测
技术领域
，尤其涉及一种水中氟嘧菌酯及其代谢物的测定方法。背景技术
氟嘧菌酯是由德国拜尔公司开发的一个广谱二氢嗪类(dihydro-dioxazines)内吸性茎叶处理用杀菌剂品种，该产品具有快速吸收、耐雨水冲刷、应用适期长、适用作物多和防治优异的优点。氟嘧菌酯主要用于防治马铃薯、蔬菜、禾谷类和咖啡中所有真菌纲病菌，具有快速杀菌和持效时间长的双重特性，且对作物具有很好的相容性。在推荐剂量使用的条件下对作物相对安全、对地下水、环境安全。对几乎所有真菌纲(担子菌纲、子囊菌纲、知菌类和类卵菌纲)病害如锈病、网斑病、霜霉病等数十种病害均有很好的活性。
氟嘧菌酯代谢物包括邻氯苯酚、M48-E和M40。氟嘧菌酯代谢物邻氯苯酚对环境危害很大，特别是对水体和土壤可造成严重污染。如果氟嘧菌酯应用不当，对地下水会有一定的污染，进而对人体也有一定的危害。目前，关于氟嘧菌酯的报道只有合成、水果和饮料中的残留检测、土壤微生物和土壤酶活性的影响、水稻植株上的残留检测，氟嘧菌酯及其代谢物的水中检测方法未见相关报道。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种水中氟嘧菌酯及其代谢物的测定方法。本发明提供的测定方法能够准确检测水中的氟嘧菌酯及其代谢物。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种水中氟嘧菌酯及其代谢物的测定方法，氟嘧菌酯代谢物包括邻氯苯酚、M48-E和M40，包括以下步骤：
将待测水样和乙腈混合，得到氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品；
将待测水样过滤，得到邻氯苯酚上机样品；
对所述氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品进行第一超高效液相色谱串联质谱检测，得到氟嘧菌酯和M48-E的色谱信息；
对所述氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品进行第二超高液相色谱串联质谱检测，得到M40色谱信息；
对所述邻氯苯酚上机样品进行第三超高液相色谱串联质谱检测，得到邻氯苯酚色谱信息；
将所述氟嘧菌酯色谱信息、M48-E的色谱信息、M40色谱信息和邻氯苯酚色谱信息代入氟嘧菌酯浓度-峰面积标准曲线、M48-E浓度-峰面积标准曲线、M40浓度-峰面积标准曲线和邻氯苯酚浓度-峰面积标准曲线，得到水中氟嘧菌酯及其代谢物的含量；
所述第一超高效液相色谱串联质谱检测的参数包括第一质谱检测参数和第一色谱检测参数；
所述第一质谱检测参数包括：离子源：ESI+；毛细管电压：5.5kV；离子源温度：550℃；气帘气：35psi；喷撞气：7psi；辅助加热气：50psi；喷雾气：50psi；射入电压：10V；碰撞室射出电压：16V；
所述第一色谱检测参数包括：色谱柱：ACQUITY UPLCTM BEH C18柱，1.7μm，2.1mm×100mm，美国Waters公司；色谱柱温度：40℃；进样量：2.00μL；流速：0.3mL·min-1；流动相A为甲酸-乙酸铵水溶液，所述甲酸-乙酸铵水溶液中甲酸的体积浓度为0.1％，乙酸铵的浓度为2mmol/L；流动相B为色谱纯乙腈；梯度洗脱程序：0～0.5min，65％A；0.5～2.0min，65％A～15％A；2.0～4.0min，15％A～2％A；4.0～4.5min，2％A；4.5～4.6min，2％～65％A；4.6～6.5min，65％A；
所述第二超高效液相色谱串联质谱检测的参数包括第二质谱检测参数和第二色谱检测参数；
所述第二质谱检测参数包括：离子源：ESI-；毛细管电压：-4.5kV；离子源温度：550℃；气帘气：35psi；喷撞气：7psi；辅助加热气：50psi；喷雾气：50psi；射入电压：-10V，碰撞室射出电压：-16V；
所述第二色谱检测参数包括：色谱柱：ACQUITY UPLCTMBEH C18柱，1.7μm，2.1mm×100mm，美国Waters公司；色谱柱温度：40℃；进样量：5.00μL；流速：0.3mL·min-1；流动相A为甲酸-乙酸铵水溶液，所述甲酸-乙酸铵水溶液中甲酸的体积浓度为0.1％，乙酸铵的浓度为2mmol/L；流动相B为色谱纯乙腈；梯度洗脱程序：0～0.5min，55％A；0.5～3.5min，55％A～5％A；3.5～4.0min，5％A；4.0～4.1min，5％～55％A；4.1～6.0min，55％A；
所述第三超高效液相色谱串联质谱检测的参数包括第三质谱检测参数和第三色谱检测参数；
所述第三质谱检测参数包括：离子源：APCI-；针电流：-3.5mA；离子源温度：350℃；气帘气：25psi；喷撞气：8psi；喷雾气：50psi；射入电压：-10V；碰撞室射出电压：-14V；
所述第三色谱检测参数包括：色谱柱：Omega Polar C18色谱柱，3μm，2.1mm×50mm，美国Phenomenex公司；流速：0.40mL/min；柱温：40℃；进样体积：20.0μL；流动相A为2mmol/L乙酸铵水溶液；流动相B为色谱纯乙腈；梯度洗脱程序：0～0.5min，80％A；0.5～2.0min，80％A～40％A；2.0～3.0min，40％A～20％A；3.0～3.5min，20％A；3.5～3.6min，20％A～80％A；3.6～5.5min，80％A。
优选地，制备氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品的过程中，待测水样和乙腈的体积比为1：1。
优选地，所述待测水样和乙腈混合之后，对所得混合液进行过滤，所述过滤的滤膜孔径为0.22μm。
优选地，所述待测水样过滤的滤膜的孔径为0.22μm。
本发明提供了一种水中氟嘧菌酯及其代谢物的测定方法，本发明的测定方法前处理方法简单，且对水中氟嘧菌酯及其代谢物的检测准确度高、灵敏度高。本发明采用APCI-源对邻氯苯酚进行检测线性范围为0.0005～0.05mg/L，LOQ为0.001mg/L，LOD为1.00×10- 2ng，比现有技术的ESI源检测的响应度(线性范围0.05～10mg/L，LOQ在0.03～1.5mg/kg)高；氟嘧菌酯、氟嘧菌酯代谢物M48-E和氟嘧菌酯M40的LOD分别为1.00×10-3ng、1.00×10- 3ng和2.5×10-3ng；氟嘧菌酯、氟嘧菌酯代谢物M48-E和氟嘧菌酯M40的在水中的最低检测浓度(LOQ)为0.00200mg·L-1。
附图说明
图1为氟嘧菌酯标准曲线回归方程；
图2为氟嘧菌酯代谢物M48-E标准曲线回归方程；
图3为氟嘧菌酯代谢物M40标准曲线回归方程；
图4为氟嘧菌酯代谢物邻氯苯酚标准曲线回归方程；
图5为不同离子源温度的峰面积响应结果图。
具体实施方式
本发明提供了一种水中氟嘧菌酯及其代谢物的测定方法，氟嘧菌酯代谢物包括邻氯苯酚、M48-E和M40，包括以下步骤：
将待测水样和乙腈混合，得到氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品；
将待测水样过滤，得到邻氯苯酚上机样品；
对所述氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品进行第一超高效液相色谱串联质谱检测，得到氟嘧菌酯和M48-E的色谱信息；
对所述氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品进行第二超高液相色谱串联质谱检测，得到M40色谱信息；
对所述邻氯苯酚上机样品进行第三超高液相色谱串联质谱检测，得到邻氯苯酚色谱信息；
将所述氟嘧菌酯色谱信息、M48-E的色谱信息、M40色谱信息和邻氯苯酚色谱信息代入氟嘧菌酯浓度-峰面积标准曲线、M48-E浓度-峰面积标准曲线、M40浓度-峰面积标准曲线和邻氯苯酚浓度-峰面积标准曲线，得到水中氟嘧菌酯及其代谢物的含量。
在本发明中，如无特殊说明，本发明所用原料均优选为市售产品。
本发明将待测水样和乙腈混合，得到氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品。
在本发明中，所述待测水样和乙腈的体积比优选为1：1。在本发明中，所述待测水样和乙腈混合后，优选还包括对所得混合体系进行涡旋和过滤，所述涡旋的时间优选为30s；所述过滤的滤膜的孔径优选为0.22μm。在本发明中，所述氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品中各物质的浓度范围优选在建立标准曲线时的浓度范围内，当氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品中各物质的浓度高于建立标准曲线时的浓度范围时，优选还包括：对所述氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品进行稀释后再过滤；所述稀释的试剂优选为去离子水和乙腈体积比1：1的混合溶剂。
本发明将待测水样过滤，得到邻氯苯酚上机样品。在本发明中，所述待测水样过滤的滤膜的孔径优选为0.22μm。在本发明中，所述邻氯苯酚上机样品中邻氯苯酚的浓度范围优选在建立标准曲线时的浓度范围内，当邻氯苯酚上机样品中邻氯苯酚的浓度高于建立标准曲线时的浓度范围时，优选还包括：对所述邻氯苯酚上机样品进行稀释后再过滤；所述稀释的试剂优选为饮用纯净水。
得到氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品后，本发明对所述氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品进行第一超高效液相色谱串联质谱检测，得到氟嘧菌酯和M48-E的色谱信息。
在本发明中，所述第一超高效液相色谱串联质谱检测的参数包括第一质谱检测参数和第一色谱检测参数。
在本发明中，所述第一质谱检测参数包括：离子源：ESI+；毛细管电压：5.5kV；离子源温度：550℃；气帘气：35psi；喷撞气：7psi；辅助加热气：50psi；喷雾气：50psi；射入电压：10V；碰撞室射出电压：16V。
在本发明中，所述第一色谱检测参数包括：色谱柱：ACQUITYUPLCTM BEH C18柱，1.7μm，2.1mm×100mm，美国Waters公司；色谱柱温度：40℃；进样量：2.00μL；流速：0.3mL·min-1；流动相A为甲酸-乙酸铵水溶液，所述甲酸-乙酸铵水溶液中甲酸的体积浓度为0.1％，乙酸铵的浓度为2mmol/L；流动相B为色谱纯乙腈；梯度洗脱程序：0～0.5min，65％A；0.5～2.0min，65％A～15％A；2.0～4.0min，15％A～2％A；4.0～4.5min，2％A；4.5～4.6min，2％～65％A；4.6～6.5min，65％A。
得到氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品后，本发明对所述氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品进行第二超高液相色谱串联质谱检测，得到M40色谱信息。
在本发明中，所述第二超高效液相色谱串联质谱检测的参数包括第二质谱检测参数和第二色谱检测参数。
在本发明中，所述第二质谱检测参数包括：离子源：ESI-；毛细管电压：-4.5kV；离子源温度：550℃；气帘气：35psi；喷撞气：7psi；辅助加热气：50psi；喷雾气：50psi；射入电压：-10V，碰撞室射出电压：-16V。
在本发明中，所述第二色谱检测参数包括：色谱柱：ACQUITYUPLCTM BEH C18柱，1.7μm，2.1mm×100mm，美国Waters公司；色谱柱温度：40℃；进样量：5.00μL；流速：0.3mL·min-1；流动相A为甲酸-乙酸铵水溶液，所述甲酸-乙酸铵水溶液中甲酸的体积浓度为0.1％，乙酸铵的浓度为2mmol/L；流动相B为色谱纯乙腈；梯度洗脱程序：0～0.5min，55％A；0.5～3.5min，55％A～5％A；3.5～4.0min，5％A；4.0～4.1min，5％～55％A；4.1～6.0min，55％A。
得到邻氯苯酚上机样品，本发明对所述邻氯苯酚上机样品进行第三超高液相色谱串联质谱检测，得到邻氯苯酚色谱信息。
在本发明中，所述第三超高效液相色谱串联质谱检测的参数包括第三质谱检测参数和第三色谱检测参数。
在本发明中，所述第三质谱检测参数包括：离子源：APCI-；针电流：-3.5mA；离子源温度：350℃；气帘气：25psi；喷撞气：8psi；喷雾气：50psi；射入电压：-10V；碰撞室射出电压：-14V。
在本发明中，所述第三色谱检测参数包括：色谱柱：Omega Polar C18色谱柱，3μm，2.1mm×50mm，美国Phenomenex公司；流速：0.40mL/min；柱温：40℃；进样体积：20.0μL；流动相A为2mmol/L乙酸铵水溶液；流动相B为色谱纯乙腈；梯度洗脱程序：0～0.5min，80％A；0.5～2.0min，80％A～40％A；2.0～3.0min，40％A～20％A；3.0～3.5min，20％A；3.5～3.6min，20％A～80％A；3.6～5.5min，80％A。
在本发明中，所述氟嘧菌酯及其代谢物定性、定量模式均为MRM多反应监测模式，表1为氟嘧菌酯及其代谢物在MRM多反应监测模式下的定量、定性参数。
表1氟嘧菌酯及其代谢物在MRM多反应监测模式下的定量、定性参数
*定量离子(qualitative ion)
得到氟嘧菌酯色谱信息、M48-E色谱信息、M40色谱信息和邻氯苯酚色谱信息后，本发明将所述氟嘧菌酯色谱信息、M48-E的色谱信息、M40色谱信息和邻氯苯酚色谱信息代入氟嘧菌酯浓度-峰面积标准曲线、M48-E浓度-峰面积标准曲线、M40浓度-峰面积标准曲线和邻氯苯酚浓度-峰面积标准曲线，得到水中氟嘧菌酯及其代谢物的含量。
在本发明中，所述氟嘧菌酯浓度-峰面积标准曲线、M48-E浓度-峰面积标准曲线和M40浓度-峰面积标准曲线的获取方式优选包括以下步骤：
称取氟嘧菌酯标准品0.0120g，用乙腈定容至10.00mL，得到浓度为1.19×103mg/L的氟嘧菌酯标准储备液；所述氟嘧菌酯标准品的纯度优选为99.33％；
称取氟嘧菌酯代谢物M48-E 0.0183g，用乙腈定容至10.00mL，得到浓度为1.73×103mg/L的氟嘧菌酯代谢物M48-E标准储备液；所述氟嘧菌酯代谢物M48-E的纯度优选为94.6％；
称取氟嘧菌酯代谢物M400.0120 g，用乙腈定容至10.00mL，得到浓度为1.11×103mg/L的氟嘧菌酯代谢物M40标准储备液；所述氟嘧菌酯代谢物M40的纯度优选为92.45％；
用乙腈稀释所述氟嘧菌酯标准储备液、氟嘧菌酯代谢物M48-E标准储备液和氟嘧菌酯代谢物M40标准储备液，得到氟嘧菌酯、氟嘧菌酯代谢物M48-E和氟嘧菌酯代谢物M40的浓度均为10.0mg·L-1的混合标准工作液；
用乙腈和去离子水的体积比为1：1的混合溶剂，逐级稀释10.0mg·L-1的混合标准工作液，得到浓度为1.00、0.100、0.0500、0.0100、0.00500、0.00100和0.000500mg·L-1的混合标准工作液；
对系列混合标准工作液进行第一超高效液相色谱串联质谱检测，得到氟嘧菌酯和氟嘧菌酯代谢物M48-E的色谱信息；将氟嘧菌酯色谱信息和氟嘧菌酯的浓度进行拟合，得到氟嘧菌酯浓度-峰面积标准曲线；将氟嘧菌酯代谢物M48-E色谱信息和氟嘧菌酯代谢物M48-E的浓度进行拟合，得到、M48-E浓度-峰面积标准曲线。
在本发明中，所述第一超高液相色谱串联质谱检测的参数优选与上述技术方案一致在此不再赘述。
对系列混合标准工作液进行第二超高效液相色谱串联质谱检测，得到氟嘧菌酯代谢物M40的色谱信息，将氟嘧菌酯代谢物M40的色谱信息和氟嘧菌酯代谢物M40的浓度进行拟合，得到氟嘧菌酯代谢物M40浓度-峰面积标准曲线。
在本发明中，所述第二超高效液相色谱串联质谱检测的参数优选与上述技术方案一致，在此不再赘述。
在本发明中，所述邻氯苯酚浓度-峰面积标准曲线的获取方式优选包括以下步骤：
称取邻氯苯酚标准品0.0116g，用乙腈定容至10.00mL，得到浓度为1.16×103mg/L的邻氯苯酚标准储备液；所述邻氯苯酚标准品的纯度优选为99.8％；
用饮用纯净水稀释所述邻氯苯酚标准储备液，得到浓度为10.0、1.00、0.100、0.0500、0.0100、0.00500、0.00100和0.000500mg/L的邻氯苯酚标准工作液；
对系列邻氯苯酚标准工作液进行第三超高液相色谱串联质谱检测，得到邻氯苯酚的色谱信息，将邻氯苯酚的色谱信息和邻氯苯酚的浓度进行拟合，得到邻氯苯酚浓度-峰面积标准曲线。
在本发明中，所述第三超高液相色谱串联质谱检测的参数优选与上述技术方案一致在此不再赘述。
下面结合实施例对本发明提供的水中氟嘧菌酯及其代谢物的测定方法进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
1.1仪器与试剂
仪器和设备：ABSciex5500液相色谱串联质谱联用仪(美国ABSciex公司)，ACQUITYUPLCTM BEH C18色谱柱(1.7μm，2.1mm×100mm，美国Waters公司)，BSA224S电子天平(感量0.0001g，德国赛多利斯集团)，MX-S可调式混匀仪(北京大龙兴创实验仪器有限公司)，50mLPPTE离心管，0.22μm有机针筒滤膜。
试剂：氟嘧菌酯(纯度：99.33％，Dr.Ehrenstorfer GmbH)，邻氯苯酚(纯度：99.8％)，氟嘧菌酯代谢物M48-E(纯度：94.6％)，氟嘧菌酯代谢物M40(纯度：92.45％)，三个代谢物均由北京科发伟业农药技术中心提供，乙腈(色谱纯，Merck公司)，甲酸和乙酸铵(色谱纯，Anaqua Chemicals Supply公司)，饮用纯净水(广州屈臣氏食品饮料有限公司)。
1.2标准溶液的配制
称取氟嘧菌酯标准品0.0120g(纯度为99.33％)，用乙腈定容至10.00mL，得到浓度为1.19×103mg/L的标准储备液；称取氟嘧菌酯代谢物M48-E 0.0183g(纯度为94.6％)，用乙腈定容至10.00mL，得到浓度为1.73×103mg/L的标准储备液；称取氟嘧菌酯代谢物M400.0120 g(纯度为92.45％)，用乙腈定容至10.00mL，得到浓度为1.11×103mg/L的标准储备液；称取邻氯苯酚标准品0.0116g(纯度为99.8％)，用乙腈定容至10.00mL，得到浓度为1.16×103mg/L的标准储备液，0℃～5℃冷藏保存，备用。
用乙腈稀释氟嘧菌酯及其代谢物(M48-E和M40)标准储备液，得到浓度为10.0mg·L-1的混合标准工作液；用V乙腈:V水＝1:1逐级稀释10.0mg·L-1的混合标准工作液，得到浓度为1.00、0.100、0.0500、0.0100、0.00500、0.00100和0.000500mg·L-1的混合标准工作液；用饮用纯净水稀释邻氯苯酚标准储备液，得到浓度为10.0、1.00、0.100、0.0500、0.0100、0.00500、0.00100和0.000500mg/L的邻氯苯酚标准工作液。
1.3样品前处理
将待测水样用乙腈将5.000mL样品定容至10.00mL，涡旋30s；过0.22μm滤膜或用V乙腈：V水＝1:1的混合溶剂稀释后过0.22μm滤膜，得到氟嘧菌酯-M48-E-M40上机样品。
邻氯苯酚：待测水样过0.22μm滤膜，或用饮用纯净水稀释后过0.22μm滤膜，得到邻氯苯酚上机样品。
1.4质谱条件
氟嘧菌酯、氟嘧菌酯代谢物M48-E：离子源：ESI+；毛细管电压5.5kV，离子源温度550℃，气帘气35psi，喷撞气7psi，辅助加热气50psi，喷雾气50psi，射入电压10V，碰撞室射出电压16V；
氟嘧菌酯代谢物M40：离子源：ESI-；毛细管电压-4.5kV，离子源温度550℃，气帘气35psi，喷撞气7psi，辅助加热气50psi，喷雾气50psi，射入电压-10V，碰撞室射出电压-16V；
邻氯苯酚：离子源：APCI-；针电流-3.5mA，离子源温度350℃，气帘气25psi，喷撞气8psi，喷雾气50psi，射入电压-10V，碰撞室射出电压-14V。
氟嘧菌酯及其代谢物定性、定量模式均为MRM多反应监测模式，定性参数如表1所示。
1.5色谱条件
氟嘧菌酯、氟嘧菌酯代谢物M48-E：色谱柱：ACQUITYUPLCTM BEH C18柱(1.7μm，2.1mm×100mm，美国Waters公司)；色谱柱温度为40℃；进样量为2.00μL；流速为0.3mL·min-1；流动相A为0.1％甲酸+2mmol/L乙酸铵水溶液；流动相B为色谱纯乙腈；梯度洗脱程序：0～0.5min，65％A；0.5～2.0min，65％A～15％A；2.0～4.0min，15％A～2％A；4.0～4.5min，2％A；4.5～4.6min，2％～65％A；4.6～6.5min，65％A。
氟嘧菌酯代谢物M40：色谱柱：ACQUITYUPLCTMBEH C18柱(1.7μm，2.1mm×100mm，美国Waters公司)；色谱柱温度为40℃；进样量为5.00μL；流速为0.3mL·min-1；流动相A为0.1％甲酸+2mmol/L乙酸铵水溶液；流动相B为色谱纯乙腈；梯度洗脱程序：0～0.5min，55％A；0.5～3.5min，55％A～5％A；3.5～4.0min，5％A；4.0～4.1min，5％～55％A；4.1～6.0min，55％A。
邻氯苯酚：色谱柱：OmegaPolar C18色谱柱(3μm，2.1mm×50mm，美国Phenomenex公司)；流速为0.40mL/min；柱温为40℃；进样体积为20.0μL；流动相A为2mmol/L乙酸铵水溶液；流动相B为色谱纯乙腈；梯度洗脱程序：0～0.5min，80％A；0.5～2.0min，80％A～40％A；2.0～3.0min，40％A～20％A；3.0～3.5min，20％A；3.5～3.6min，20％A～80％A；3.6～5.5min，80％A。
2结果与分析
2.1回归方程
将浓度为1.00、0.100、0.0500、0.0100、0.00500、0.00100和0.000500mg·L-1的混合标准工作液和浓度为10.0、1.00、0.100、0.0500、0.0100、0.00500、0.00100和0.000500mg/L的邻氯苯酚标准工作液按照上述质谱条件-色谱条件进行检测分析，以浓度-峰面积构建标准曲线；结果如图1～图4所示，具体为：
氟嘧菌酯：y＝415730151x+82490，R2＝0.9999；
氟嘧菌酯代谢物M48-E：y＝65518514x-5619，R2＝1.0000；
氟嘧菌酯代谢物M40：y＝1964557x-381，R2＝0.9996；
氟嘧菌酯代谢物邻氯苯酚：y＝9337889x+5757，R2＝0.9995。
2.2回收率和精密度
氟嘧菌酯及其代谢物(M48-E和M40)在3个加标水平(0.002mg·L-1、0.100mg·L-1和10.0mg·L-1)，5个重复下的平均回收率和相对标准偏差见表2。邻氯苯酚在3个加标水平(0.001、0.100和10.0mg·L-1)，每档浓度设5个平行样品，平均回收率和相对标准偏差见表2。
表2水中氟嘧菌酯及其代谢物的回收率和相对标准偏差
从表2可以看出：样品在0.00200、0.100和10.0mg·L-1添加水平下，氟嘧菌酯及代谢物(M48-E和M40)的平均回收率为81.8％～109％，相对标准偏差RSD(n＝5)为1.72％～7.38％；。邻氯苯酚在0.00100、92.8mg·L-1添加水平下，平均回收率为89.6％和102％，相对标准偏差RSD(n＝3)为6.06％和8.84％。
2.3检出限和定量限
用标准曲线最低一档浓度乘以进样量作为仪器的最小检出量(LOD)，氟嘧菌酯、氟嘧菌酯代谢物M48-E和氟嘧菌酯M40的LOD分别为1.00×10-3ng、1.00×10-3ng和2.5×10- 3ng；氟嘧菌酯、氟嘧菌酯代谢物M48-E和氟嘧菌酯M40的在水中的最低检测浓度(LOQ)为0.00200mg·L-1；仪器对邻氯苯酚的最小检出量(LOD)分别为1.00×10-2ng，邻氯苯酚在水中的最低检测浓度(LOQ)为0.00100mg·L-1。
2.4前处理方法的优化
氟嘧菌酯及其代谢物(M48-E和M40)：选择两种有机溶剂(乙酸乙酯和乙腈)提取和乙腈稀释三种前处理方法，结果表明，乙酸乙酯提取氟嘧菌酯及其代谢物(M48-E和M40)(n＝3)的回收率为分别为84.5％～94.4％，39.8％～46.9％，39.0％～39.7％，M48-E和M40回收率达不到要求；乙腈提取氟嘧菌酯及其代谢物(M48-E和M40)(n＝3)的回收率为分别为98.2％～103％，89.3％～97.2％，104％～112％，回收率都能达到要求；乙腈稀释氟嘧菌酯及其代谢物(M48-E和M40)(n＝3)的回收率为分别为99.3％～118％，99.5％～104％，100％～107％，回收率都能达到要求；由于乙腈配制M40的标准工作液标准曲线不成线性，为了消除溶剂效应，故选择乙腈稀释的方法作为最优前处理方法
2.5邻氯苯酚质谱条件的选择
邻氯苯酚：对比ESI-源和APCI-源，同一浓度的样品，APCI-源响应值较高，故选择APCI-源检测。
优化离子源参数：对比气帘气分别为25psi、30psi和35psi时峰面积的响应值，结果为：气帘气25psi时，峰面积为253347，气帘气30psi时，峰面积为145218，气帘气35psi时，峰面积为170770。可见：气帘气25psi响应值最高，选择气帘气为25psi。
离子源温度：对比离子源温度400℃、350℃、300℃和250℃的峰面积响应值，结果如图5所示。从图5可以看出：离子源温度为350℃时，峰面积的响应值最高，对于邻氯苯酚来说，通过优化质谱参数，大大提高了灵敏度。
2.6色谱条件优化
分别以0.1％甲酸水溶液-乙腈、2mmol/L乙酸铵水溶液-乙腈、0.1％甲酸+2mmol/L乙酸铵水溶液-乙腈三种条件作为洗脱溶剂，对比目标物的响应和峰形，氟嘧菌酯及其代谢物(M48-E和M40)在0.1％甲酸+2mmol/L乙酸铵水溶液和乙腈洗脱条件下，灵敏度较高，保留时间适中，峰形较好；邻氯苯酚在2mmol/L乙酸铵水溶液和乙腈洗脱条件下，响应值较高，峰形较好。
实施例2
实际样品检测
2021年2月采自杭州的西湖水、钱塘江水、运河水、笕桥横塘河水和实验室附近河水5个地点的实际样品进行筛查发现，该5个点的氟嘧菌酯检出浓度在0.00000717～0.0000226mg·L-1之间，均小于最低检出浓度，氟嘧菌酯3个代谢物均未检出。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
