本发明公开了一种检测四唑虫酰胺及其代谢物残留量的方法及其应用,取待测样品加水,以使待测样品含水量大于75%,加入提取剂进行提取,再进行盐析,盐析后固液分离,收集滤液,萃取,浓缩,获得提取液,再利用分散固相萃取剂对提取液中的基质进行净化处理,获得供试溶液;取不含四唑虫酰胺及其代谢物的同种类基质的空白样品,按照步骤S1进行处理,得到空白样品基质溶液,向空白样品基质溶液中加入四唑虫酰胺及其代谢物标准品以配制得标准溶液,最终配制成含有四唑虫酰胺及其代谢物至少5个梯度浓度的基质标准工作溶液;定性检测和定量检测。本发明的检测四唑虫酰胺及其代谢物残留量的方法,具有操作简便、快速、准确、灵敏度高及重复性好的优点。