本发明公开了一种具有仿生矿化和抗菌功能的聚乳酸纳米纤维复合膜及其制备方法和应用,属于生物医用材料技术领域。本发明所述的聚乳酸纳米纤维复合膜PLA@PDA@(LbL)-n,具体由聚乳酸纳米纤维膜基体(PLA),聚多巴胺过渡层(PDA)和功能涂层(LbL)-n组成;其中:所述聚多巴胺过渡层设置在聚乳酸纳米纤维膜基体和功能涂层之间,所述功能涂层是通过静电层层自组装获得的ε-聚赖氨酸和海藻酸复合涂层。本发明制备的聚乳酸纳米纤维复合膜具有很好的仿生矿化能力、良好的抗菌性能及良好的生物相容性,在骨组织修复、引导骨组织再生膜等生物医用领域具有很好的应用前景。