本发明涉及免疫检测技术领域,尤其是一种基于重组基因工程抗体和微球的定向偶联方法及应用,该方法包括以下步骤:A.将鼠源单克隆抗体Fab段与人源化的IgG1的Fc段进行基因重组,并对人源化的IgG1的Fc段进行突变,在Fc段末端引入半胱氨酸;B.然后通过双功能交联剂,将抗体Fc段定向偶联至氨基微球上。本发明通过重组基因工程抗体的方式,在Fc段精准引入巯基,可避免试剂制备中需要对抗体进行复杂的前处理步骤,保证试剂的批间一致性;通过对Fc段进行了人源化改造,可避免检测样本时的异嗜性抗体等的干扰;并且通过定向偶联技术,提高了试剂测试的准确度以及灵敏度。