一种病理标本封固液及其制备、封固方法
技术领域
本发明涉及实验器材领域，尤其涉及一种病理标本封固液及其制备、封固方法。
背景技术
目前常见标本的形式为载玻片—粘合剂—盖玻片，制作方法有手工和机器两种。
手工方式存在以下缺点：盖玻片很薄，用手拿的话容易割伤且容易留下指纹，会影响显微镜下观察；而用镊子夹取的话，容易夹裂或夹碎；同时人工封片对操作人员要求高，要控制好每张片子所需的粘合剂(胶)的量，不能漏胶和溢胶；并且对操作手法有要求，避免气泡的产生；此外要控制盖压的力度，不得损伤样品，影响观察。
机器封片常用在医院病理科，采用全自动染色胶片封片机。虽然封片机大大提升了工作效率，使得切片质量更加规范标准化，但是其封片成本高、消耗快，同时在胶片封片时要配合溶剂二甲苯使用，二甲苯有毒且具刺激性气味，长期使用会影响操作人员的健康。此外，在临床实践中，采用胶片封存的标本在数年后会有褪色现象，影响复诊或者科研所需，已无法满足医学上的使用需求。
发明内容
本发明目的是针对上述问题，提供一种封固效率更高、使用效果更好的病理标本封固液及其制备、封固方法。
为了实现上述目的，本发明的技术方案是：
一种病理标本封固液，所述病理标本封固液的原料包括低聚物、活性单体、引发剂、流平剂、消泡剂、偶联剂、抗氧化剂；各原料的份数为低聚物30～55份，活性单体45～60份、引发剂3～10份、流平剂0.1～1份、消泡剂0.1～1份、偶联剂0.1～1份、抗氧化剂0.1～1份。
进一步的，所述低聚物为聚酯丙烯酸树脂、聚氨酯丙烯酸树脂、环氧改性丙烯酸树脂、丙烯酸树脂中的一种或多种混合。
进一步的，所述聚氨酯丙烯酸树脂为脂肪族聚氨酯丙烯酸树脂，环氧改性丙烯酸树脂为双酚A环氧丙烯酸树脂。
进一步的，所述活性单体为异冰片丙烯酸脂、异冰片甲基丙烯酸脂、甲基丙烯酸羟乙酯、1,6-己二醇二丙烯酸酯、三丙二醇二丙烯酸酯、新戊二醇二丙烯酸酯、三羟甲基丙烷三丙烯酸酯、季戊四醇三丙烯酸酯、双季戊四醇六丙烯酸酯中的一种或多种混合。
进一步的，所述引发剂为2-羟基-2-甲基-1-苯基丙酮、1-羟基环己基苯基甲酮、2,4,6-三甲基苯甲酰基-二苯基氧化膦、2-甲基-2-(4-吗啉基)-1-[4-(甲硫基)苯基]-1-丙酮、苯基双(2,4,6-三甲基苯甲酰基)氧化膦、二苯甲酮、2-异丙基硫杂蒽酮、2,4-二乙基硫杂蒽酮、有机胺中的一种或多种混合。
进一步的，所述流平剂为BYK333、TEGO2100中的一种或两种混合；所述消泡剂为TEGO920、KS66中的一种或两种混合；所述偶联剂为KH550、KH560、KH570中的一种或多种混合；所述抗氧化剂为抗氧剂6026、抗氧剂1010、抗氧剂1076中的一种或多种混合。
一种病理标本封固液的制备方法，包括以下步骤：
S1、按份数称量低聚物、活性单体、引发剂、流平剂、消泡剂、偶联剂、抗氧化剂；
S2、将低聚物、活性单体、引发剂、流平剂、消泡剂、偶联剂、抗氧化剂依次加入到容器中，得到混合溶液；
S3、令容器内温度保持在40～55℃，使用搅拌器以1000～2000rpm/min的转速搅拌10～20分钟，然后降低转速缓慢搅拌，直至容器内混合溶液的气泡逐渐消除；
S4、使用过滤网对混合溶液进行过滤，然后使用真空抽气泵对滤液进行抽气消泡处理，滤液静置冷却后即得到所制备的病理标本封固液。
进一步的，所述步骤S4中的过滤网为1000目过滤网。
一种病理标本封固液的封固方法，包括以下步骤：
步骤一、将处理后的标本载玻片放置在水平位置，然后在载玻片表面涂覆病理标本封固液；
步骤二、病理标本封固液在载玻片表面流平后，使用紫外光对病理标本封固液进行照射即完成标本载玻片的封固操作。
进一步的，所述步骤二中，紫外光的波长为365～405nm，光照强度为60～300mW/cm2，光照时长为5～60s。
与现有技术相比，本发明具有的优点和积极效果是：
1、本发明中的病理标本封固液具有粘附性强，快干，硬度佳，抗划痕，透明度高，耐候性佳，无气泡，透光率高等优点，病理标本封固液经紫外线光照射后即可固化，封固后表面平整，不发雾、耐黄变、无裂纹出现，完全可以替代盖玻片使用；
2、本发明中所含的引发剂在吸收紫外光后，产生活性自由基或阳离子，从而引发单体聚合、交联化学反应，使病理标本封固液在数秒钟内由液态转化为固态，提高了载玻片的封片效率；
3、本发明中的病理标本封固液中无VOC挥发物，其所有成分均不在环保法规中限制，具有极好的环保效果，同时其固化速度快，几秒至几十秒即可完成固化，固化后即可进行检测以及搬运操作，有利于自动化生产，可以明显提高生产速率；
4、本发明中所含的抗氧化剂有助于延缓标本片子老化变黄，使得标本片子在多年后仍然可以保持较好的色泽，提高了样本的存储时间，可以满足医学上的使用需求。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明的使用效果图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
实施例1
1)使用聚酯丙烯酸树脂45份、异冰片甲基丙烯酸脂5份、1,6-己二醇二丙烯酸酯20份、三丙二醇二丙烯酸酯15份、双季戊四醇六丙烯酸酯10份、1-羟基环己基苯基甲酮2份、2,4,6-三甲基苯甲酰基-二苯基氧化膦2份、0.5份流平剂BYK333、0.5份消泡剂TEGO920、1份偶联剂KH550、0.5份抗氧剂6026制备病理标本封固液。
2)将已经前处理好的标本载玻片放置在水平位置，然后涂覆病理标本封固液，迅速流平后，经紫外光照射，得到病理标本封固液封固的载玻片。
3)得到病理标本封固液封固涂层光滑平整，整体透光率达90％以上。用铅笔硬度计测试涂层硬度，中华绘图铅笔，750g力，硬度达到H级。用划格法胶带测试涂层的附着力，结果为1级。
实施例2
1)使用聚氨酯丙烯酸树脂50份、异冰片丙烯酸脂5份、三丙二醇二丙烯酸酯15份、三羟甲基丙烷三丙烯酸酯10份、季戊四醇三丙烯酸酯10份、2-羟基-2-甲基-1-苯基丙酮3份、苯基双(2,4,6-三甲基苯甲酰基)氧化膦1份、0.5份流平剂BYK333、0.5份消泡剂TEGO920、1份偶联剂KH560、0.5份抗氧剂1010制备病理标本封固液。
2)将已经前处理好的标本载玻片放置在水平位置，然后涂覆病理标本封固液，迅速流平后，经紫外光照射，得到病理标本封固液封固的载玻片。
3)得到病理标本封固液封固涂层光滑平整，整体透光率达90％以上。用铅笔硬度计测试涂层硬度，中华绘图铅笔，750g力，硬度达到H级。用划格法胶带测试涂层的附着力，结果为1级。
实施例3
1)使用环氧改性丙烯酸树脂55份、甲基丙烯酸羟乙酯8份、新戊二醇二丙烯酸酯10份、三羟甲基丙烷三丙烯酸酯12份、双季戊四醇六丙烯酸酯10份、2-甲基-2-(4-吗啉基)-1-[4-(甲硫基)苯基]-1-丙酮3份、2-异丙基硫杂蒽酮2份、0.4份流平剂TEGO2100、0.3份消泡剂KS66、1份偶联剂KH570、0.5份抗氧剂6026制备病理标本封固液。
2)将已经前处理好的标本载玻片放置在水平位置，然后涂覆病理标本封固液，迅速流平后，经紫外光照射，得到病理标本封固液封固的载玻片。
3)得到病理标本封固液封固涂层光滑平整，整体透光率达91％以上。用铅笔硬度计测试涂层硬度，中华绘图铅笔，750g力，硬度达到H级。用划格法胶带测试涂层的附着力，结果为1级。
实施例4
1)使用聚酯丙烯酸树脂20份、环氧改性丙烯酸树脂25份、异冰片甲基丙烯酸脂5份、新戊二醇二丙烯酸酯20份、季戊四醇三丙烯酸酯25份、有机胺5份、二苯甲酮2份、1-羟基环己基苯基甲酮2份、2,4,6-三甲基苯甲酰基-二苯基氧化膦1份、0.4份流平剂BYK333、0.5份消泡剂TEGO920、1份偶联剂KH550、0.5份抗氧剂1076制备病理标本封固液。
2)将已经前处理好的标本载玻片放置在水平位置，然后涂覆病理标本封固液，迅速流平后，经紫外光照射，得到病理标本封固液封固的载玻片。
3)得到病理标本封固液封固涂层光滑平整，整体透光率达90％以上。用铅笔硬度计测试涂层硬度，中华绘图铅笔，750g力，硬度达到H级。用划格法胶带测试涂层的附着力，结果为1级。
实施例5
1)使用聚氨酯丙烯酸树脂20份、环氧改性丙烯酸树脂30份、异冰片丙烯酸脂5份、1,6-己二醇二丙烯酸酯15份、三羟甲基丙烷三丙烯酸酯15份、双季戊四醇六丙烯酸酯10份、有机胺4份、二苯甲酮1.5份、2-甲基-2-(4-吗啉基)-1-[4-(甲硫基)苯基]-1-丙酮3份、2-异丙基硫杂蒽酮1份、0.3份流平剂TEGO2100、0.5份消泡剂KS66、1份偶联剂KH570、0.5份抗氧剂6026制备病理标本封固液。
2)将已经前处理好的标本载玻片放置在水平位置，然后涂覆病理标本封固液，迅速流平后，经紫外光照射，得到病理标本封固液封固的载玻片。
3)得到病理标本封固液封固涂层光滑平整，整体透光率达90％以上。用铅笔硬度计测试涂层硬度，中华绘图铅笔，750g力，硬度达到H级。用划格法胶带测试涂层的附着力，结果为1级。
实施例6
1)使用环氧改性丙烯酸树脂35份、丙烯酸树脂20份、甲基丙烯酸羟乙酯5份、新戊二醇二丙烯酸酯20份、季戊四醇三丙烯酸酯10份、双季戊四醇六丙烯酸酯5份、有机胺4.5份、二苯甲酮1份、2-羟基-2-甲基-1-苯基丙酮3份、2,4-二乙基硫杂蒽酮1份、0.5份流平剂BYK333、0.4份消泡剂TEGO920、1份偶联剂KH560、0.5份抗氧剂6026制备病理标本封固液。
2)将已经前处理好的标本载玻片放置在水平位置，然后涂覆病理标本封固液，迅速流平后，经紫外光照射，得到病理标本封固液封固的载玻片。
3)得到病理标本封固液封固涂层光滑平整，整体透光率达90％以上。用铅笔硬度计测试涂层硬度，中华绘图铅笔，750g力，硬度达到H级。用划格法胶带测试涂层的附着力，结果为1级。
实施例7
1)使用聚酯丙烯酸树脂28份、丙烯酸树脂22份、1,6-己二醇二丙烯酸酯20份、三羟甲基丙烷三丙烯酸酯20份、双季戊四醇六丙烯酸酯5份、二苯甲酮1份、1-羟基环己基苯基甲酮4份、2,4-二乙基硫杂蒽酮1份、0.4份流平剂BYK333、0.5份消泡剂KS66、1份偶联剂KH550、0.5份抗氧剂6026制备病理标本封固液。
2)将已经前处理好的标本载玻片放置在水平位置，然后涂覆病理标本封固液，迅速流平后，经紫外光照射，得到病理标本封固液封固的载玻片。
3)得到病理标本封固液封固涂层光滑平整，整体透光率达90％以上。用铅笔硬度计测试涂层硬度，中华绘图铅笔，750g力，硬度达到H级。用划格法胶带测试涂层的附着力，结果为1级。
实施例8
1)使用聚氨酯丙烯酸树脂30份、丙烯酸树脂18份、新戊二醇二丙烯酸酯22份、三羟甲基丙烷三丙烯酸酯15份、季戊四醇三丙烯酸酯10份、2,4,6-三甲基苯甲酰基-二苯基氧化膦2份、1-羟基环己基苯基甲酮3份、2-异丙基硫杂蒽酮1份、0.5份流平剂TEGO2100、0.5份消泡剂TEGO920、1份偶联剂KH570、0.5份抗氧剂1010制备病理标本封固液。
2)将已经前处理好的标本载玻片放置在水平位置，然后涂覆病理标本封固液，迅速流平后，经紫外光照射，得到病理标本封固液封固的载玻片。
3)得到病理标本封固液封固涂层光滑平整，整体透光率达90％以上。用铅笔硬度计测试涂层硬度，中华绘图铅笔，750g力，硬度达到H级。用划格法胶带测试涂层的附着力，结果为1级。
实施例9
1)使用聚酯丙烯酸树脂32份、聚氨酯丙烯酸树脂20份、甲基丙烯酸羟乙酯5份、季戊四醇三丙烯酸酯30份、双季戊四醇六丙烯酸酯8份、2,4,6-三甲基苯甲酰基-二苯基氧化膦1份、2-羟基-2-甲基-1-苯基丙酮3份、2,4-二乙基硫杂蒽酮1份、0.5份流平剂BYK333、0.5份消泡剂TEGO920、1份偶联剂KH550、0.5份抗氧剂6026制备病理标本封固液。
2)将已经前处理好的标本载玻片放置在水平位置，然后涂覆病理标本封固液，迅速流平后，经紫外光照射，得到病理标本封固液封固的载玻片。
3)得到病理标本封固液封固涂层光滑平整，整体透光率达90％以上。用铅笔硬度计测试涂层硬度，中华绘图铅笔，750g力，硬度达到H级。用划格法胶带测试涂层的附着力，结果为1级。
实施例10
1)使用聚酯丙烯酸树脂10份、聚氨酯丙烯酸树脂12份、环氧改性丙烯酸树脂18份、甲基丙烯酸羟乙酯5份、三丙二醇二丙烯酸酯20份、季戊四醇三丙烯酸酯30份、苯基双(2,4,6-三甲基苯甲酰基)氧化膦1份、2-羟基-2-甲基-1-苯基丙酮4份、0.5份流平剂BYK333、0.5份消泡剂TEGO920、1份偶联剂KH560、0.5份抗氧剂6026制备病理标本封固液。
2)将已经前处理好的标本载玻片放置在水平位置，然后涂覆病理标本封固液，迅速流平后，经紫外光照射，得到病理标本封固液封固的载玻片。
3)得到病理标本封固液封固涂层光滑平整，整体透光率达90％以上。用铅笔硬度计测试涂层硬度，中华绘图铅笔，750g力，硬度达到H级。用划格法胶带测试涂层的附着力，结果为1级。
如图1所示，本发明在进行使用时，首先在载玻片1上放置标本2，然后在标本2以及载玻片1上方涂上病理标本封固液，通过紫外光照射后形成封固涂层3即可，其使用效果更好，从而验证了本发明中的病理标本封固液完全可以代替盖玻片使用。
在标本以及载玻片进行处理后，将经过抽真空处理后的病理标本封固液直接涂在细胞或者组织标本上，澄清透亮，基本无气泡产生，流平5～10s后，在波长为365～405nm、光强为60～300mW/cm2的紫外光中照射约5～60s，基本完全封固、无收缩变形，操作安全简单方便，成本低；并且该病理标本封固液可采用点胶机进行涂胶，实现精准操作，胶层厚度可视需求在50～250um范围内调整，进一步提高了本发明的使用效果。
本发明具有以下有益效果：
1、本发明中的病理标本封固液具有粘附性强，快干，硬度佳，抗划痕，透明度高，耐候性佳，无气泡，透光率高等优点，病理标本封固液经紫外线光照射后即可固化，封固后表面平整，不发雾、耐黄变、无裂纹出现，完全可以替代盖玻片使用；
2、本发明中所含的引发剂在吸收紫外光后，产生活性自由基或阳离子，从而引发单体聚合、交联化学反应，使病理标本封固液在数秒钟内由液态转化为固态，提高了载玻片的封片效率；
3、本发明中的病理标本封固液中无VOC挥发物，其所有成分均不在环保法规中限制，具有极好的环保效果，同时其固化速度快，几秒至几十秒即可完成固化，固化后即可进行检测以及搬运操作，有利于自动化生产，可以明显提高生产速率；
4、本发明中所含的抗氧化剂有助于延缓标本片子老化变黄，使得标本片子在多年后仍然可以保持较好的色泽，提高了样本的存储时间，可以满足医学上的使用需求。
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