一种提高硫酸软骨素澄清度工艺
技术领域
本发明属于生化产品加工
技术领域
，具体是指一种提高硫酸软骨素澄清度工艺。背景技术
硫酸软骨素(Chondroitin Sulfate，简称CHS)是一类动物性粘多糖，由动物喉骨、鼻软骨、气管或骨腱、韧带等含硫酸软骨素的软骨组织制取。在软骨中，硫酸软骨素与蛋白质(如胶原蛋白)结合在一起，以蛋白多糖的形式存在。目下硫酸软骨素基本是采用碱性蛋白酶2709酶解后、再树脂吸附的生产工艺。硫酸软骨素与蛋白质是以共价键形式结合的，因2709蛋白酶的局限性，致使物料中一些蛋白质、核酸等残留在软骨素上。再加上其它性质的不溶性杂质影响，致使硫酸软骨素纯度不高，澄清度不合格，严重影响产品销售。本文采用二次酶解及去除酸碱不溶性杂质的新工艺，可以使硫酸软骨素澄清度及纯度得到提高，特别是澄清度获得明显改进。
发明内容
为了解决上述难题，本发明提供了一种提高硫酸软骨素的澄清度及纯度，获得高品质的硫酸软骨素，以便产品进入高端市场的提高硫酸软骨素澄清度工艺。
为了实现上述功能，本发明包括如下步骤：(1)原料提取：取鸡骨渣100份，自来水350份进行混合，混合后使用压力罐进行加热，静置15h，一次抽提115～120℃、60-80min；加相同量的水进行二次抽提130～135℃、50-60min，1h后停止搅拌；
(2)一次酶解：酶解前捞油，加入酶解用2709蛋白酶，调节pH至8.5，温度保持在54℃，酶解4h，之后使用柠檬酸调pH值至6.2，静置，之后加热至90℃，停留10min；
(3)吸附：调节pH至7.2，调节温度至50～60℃，加入树脂10～20份，吸附5h，得洗脱液；
(4)氧化：收集后前树脂使用浸泡盐水中，收集所有洗脱液，加入双氧水，同时调节pH至10.5，氧化4h，氧化完成后使用板框滤布过滤氧化液；
(5)二次酶解：加入菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行二次霉解，菠萝蛋白酶与木瓜蛋白酶的质量比为2:1，添加量为氧化液质量的0.5％，调节温度至60-65℃，对氧化液酶解2h；
(6)碱处理：先用碳酸氢钠调节pH值7～9，搅拌10min，静置1.5h；再用浓度质量为30％碱液调节溶液pH在11～12，搅拌10min，静置1.5h，之后用滤布过滤，去除碱不溶性杂质；
(7)酸处理：用浓度质量为60％乳酸调节步骤(6)中的滤液的pH值至2～3，搅拌10min，静置，之后用滤布去除酸不溶性杂质；
(8)醇沉：使用质量分数为74％的酒精溶液进行醇沉，醇沉8h后，抽出酒精；
(9)脱水：使用离心机脱水，放入真空干燥箱中烘干；
(10)成品：降温后得到硫酸软骨素成品。
进一步地，所述步骤(3)中树脂为罗门哈斯树脂，所述树脂为18份。
进一步地，所述步骤(4)中双氧水的加入量为洗脱液质量的2％。
进一步地，所述步骤(9)中真空干燥箱中的温度为55～60℃。
本发明采取上述结构取得有益效果如下：本发明提供的一种提高硫酸软骨素澄清度工艺操作简单，主要通过二次酶解、碱处理和酸处理三种区别区别于传统的制作工艺，提高硫酸软骨素的澄清度及纯度，获得高品质的硫酸软骨素，以便产品进入高端市场的提高硫酸软骨素澄清度工艺。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
本发明一种提高硫酸软骨素澄清度工艺，包括下述生产工艺：(1)原料提取：取鸡骨渣100份，自来水350份进行混合，混合后使用压力罐进行加热，静置15h，一次抽提115～120℃、60-80min；加相同量的水进行二次抽提130～135℃、50-60min，1h后停止搅拌；
(2)一次酶解：酶解前捞油，加入酶解用2709蛋白酶，调节pH至8.5，温度保持在54℃，酶解4h，之后使用柠檬酸调pH值至6.2，静置，之后加热至90℃，停留10min；
(3)吸附：调节pH至7.2，调节温度至50～60℃，加入树脂10～20份，吸附5h，得洗脱液；
(4)氧化：收集后前树脂使用浸泡盐水中，收集所有洗脱液，加入双氧水，同时调节pH至10.5，氧化4h，氧化完成后使用板框滤布过滤氧化液；
(5)二次酶解：加入菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行二次霉解，菠萝蛋白酶与木瓜蛋白酶的质量比为2:1，添加量为氧化液质量的0.5％，调节温度至60℃，对氧化液酶解2h；
(6)碱处理：先用碳酸氢钠调节pH值8，搅拌10min，静置1.5h；再用浓度质量为30％碱液调节溶液pH在11，搅拌10min，静置1.5h，之后用滤布过滤，去除碱不溶性杂质；
(7)酸处理：用浓度质量为60％乳酸调节步骤(6)中的滤液的pH值至2，搅拌10min，静置，之后用滤布去除酸不溶性杂质；
(8)醇沉：使用质量分数为74％的酒精溶液进行醇沉，醇沉8h后，抽出酒精；
(9)脱水：使用离心机脱水，放入真空干燥箱中58℃烘干；
(10)成品：降温后得到硫酸软骨素成品。
实施例2：
本发明一种提高硫酸软骨素澄清度工艺，包括下述生产工艺：(1)原料提取：取鸡骨渣20～100份，自来水100～500份进行混合，混合后使用压力罐进行加热，静置15h，一次抽提115～120℃、60-80min；加相同量的水进行二次抽提130～135℃、50-60min，1h后停止搅拌；
(2)一次酶解：酶解前捞油，加入酶解用2709蛋白酶，调节pH至8.5，温度保持在54℃，酶解4h，之后使用柠檬酸调pH值至6.2，静置，之后加热至90℃，停留10min；
(3)吸附：调节pH至7.2，调节温度至50～60℃，加入树脂10～20份，吸附5h，得洗脱液；
(4)氧化：收集后前树脂使用浸泡盐水中，收集所有洗脱液，加入双氧水，同时调节pH至10.5，氧化4h，氧化完成后使用板框滤布过滤氧化液；
(5)二次酶解：加入菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行二次霉解，菠萝蛋白酶与木瓜蛋白酶的质量比为2:1，添加量为氧化液质量的0.5％，调节温度至65℃，对氧化液酶解2h；
(6)碱处理：先用碳酸氢钠调节pH值9，搅拌10min，静置1.5h；再用浓度质量为30％碱液调节溶液pH在11.5，搅拌10min，静置1.5h，之后用滤布过滤，去除碱不溶性杂质；
(7)酸处理：用浓度质量为60％乳酸调节步骤(6)中的滤液的pH值至3，搅拌10min，静置，之后用滤布去除酸不溶性杂质；
(8)醇沉：使用质量分数为74％的酒精溶液进行醇沉，醇沉8h后，抽出酒精；
(9)脱水：使用离心机脱水，放入真空干燥箱中55℃烘干；
(10)成品：降温后得到硫酸软骨素成品。。
实施例3：
本发明一种提高硫酸软骨素澄清度工艺，包括下述生产工艺：(1)原料提取：取鸡骨渣100份，自来水350份进行混合，混合后使用压力罐进行加热，静置15h，一次抽提115～120℃、60-80min；加相同量的水进行二次抽提130～135℃、50-60min，1h后停止搅拌；
(2)一次酶解：酶解前捞油，加入酶解用2709蛋白酶，调节pH至8.5，温度保持在54℃，酶解4h，之后使用柠檬酸调pH值至6.2，静置，之后加热至90℃，停留10min；
(3)吸附：调节pH至7.2，调节温度至50～60℃，加入树脂10～20份，吸附5h，得洗脱液；
(4)氧化：收集后前树脂使用浸泡盐水中，收集所有洗脱液，加入双氧水，同时调节pH至10.5，氧化4h，氧化完成后使用板框滤布过滤氧化液；
(5)二次酶解：加入菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行二次霉解，菠萝蛋白酶与木瓜蛋白酶的质量比为2:1，添加量为氧化液质量的0.5％，调节温度至63℃，对氧化液酶解2h；
(6)碱处理：先用碳酸氢钠调节pH值8，搅拌10min，静置1.5h；再用浓度质量为30％碱液调节溶液pH在12，搅拌10min，静置1.5h，之后用滤布过滤，去除碱不溶性杂质；
(7)酸处理：用浓度质量为60％乳酸调节步骤(6)中的滤液的pH值至2.5搅拌10min，静置，之后用滤布去除酸不溶性杂质；
(8)醇沉：使用质量分数为74％的酒精溶液进行醇沉，醇沉8h后，抽出酒精；
(9)脱水：使用离心机脱水，放入真空干燥箱中60℃烘干；
(10)成品：降温后得到硫酸软骨素成品。
以上对本发明及其实施方式进行了描述，这种描述没有限制性。总而言之如果本领域的普通技术人员受其启示，在不脱离本发明创造宗旨的情况下，不经创造性的设计出与该技术方案相似的结构方式及实施例，均应属于本发明的保护范围。
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