一种用于肿瘤显像的放射性同位素标记多肽
技术领域
本发明属于生物医学
技术领域
，具体涉及一种用于肿瘤显像的放射性同位素标记多肽。背景技术
肿瘤是指机体在各种致瘤因子作用下，局部组织细胞增生所形成的新生物，因为这种新生物多呈占位性块状突起，也称赘生物。研究发现，肿瘤细胞会出现不同于正常细胞的代谢变化，同时肿瘤细胞自身可通过糖酵解和氧化磷酸化之间的转换来适应代谢环境的改变。2019年，Cancer Cell最新刊登了一篇文章，研究人员发现在禁食状态下使用二甲双胍可以显著抑制肿瘤生长，并提出PP2A-GSK3β-MCL-1通路可能是肿瘤治疗的新靶点。
肿瘤受体显像是利用放射性核素标记的受体配体与肿瘤组织中高表达的受体特异性结合的原理，从而显示肿瘤受体空间分布、密度及亲和力的显像技术。它具有高亲和力与高特异性、放射性到达靶点和血液清除较快、组织穿透能力强等特点，因此能在较短时间内获得高对比度的肿瘤影像，且几乎没有人体免疫反应发生。
在现有的肿瘤受体显像中，并未对肿瘤细胞内多肽使用放射性同位素进行详细研究，因此无法了解肿瘤细胞内多肽内同位素表达位置，在肿瘤治疗过程中无法将药物作用于靶点位置，影响对肿瘤患者的治疗。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供一种用于肿瘤显像的放射性同位素标记多肽，以解决上述背景技术中提出的无法了解肿瘤细胞内多肽内同位素表达位置的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种用于肿瘤显像的放射性同位素标记多肽，包括以下步骤：
步骤一：选择合适实验对象；
步骤二：从生物细胞数据库内选取肿瘤细胞，在体外培养肿瘤细胞，建立肿瘤模型，对肿瘤模型内肿瘤细胞进行蛋白检测，获取肿瘤细胞内多肽排列组合顺序；
步骤三：在肿瘤模型内取出部分肿瘤细胞，将肿瘤体内接种在实验对象体内，定期观察肿瘤细胞增殖情况，筛选出接种成功的实验群体；
步骤四：配制氯胺-T氧化剂水溶液，制备标记抗体蛋白，将标记抗体蛋白通过蛋白载体导入到实验群体内，等待肿瘤细胞增殖后通过核医学显像设备观察肿瘤显像情况；
步骤五：通过肿瘤显像情况观察标记抗体蛋白表达情况，并记录数据结果。
优选的，所述步骤一中，从白鼠群体内挑选出年轻、健康、生命力旺盛的实验鼠群，并将实验鼠群放置在环境适宜条件下饲养。
优选的，所述步骤二中，在生物细胞数据库内选取鼠群较为典型且容易观察的肿瘤细胞，例如脂肪瘤和皮肤肿瘤。
优选的，所述步骤二中，提取生物细胞数据库肿瘤细胞，将肿瘤细胞放置在活化条件下进行活性处理，将活性处理后的肿瘤细胞放置在装有培养液的培养皿内培养，肿瘤细胞增殖后，获取多个实验肿瘤细胞。
优选的，所述步骤二中，取出部分实验肿瘤细胞，将实验肿瘤细胞放置在另一组培养皿内，在培养皿内加入适量的蛋白水解酶，测定肿瘤细胞内多肽排列顺序。
优选的，所述步骤三中，取出部分肿瘤细胞，将肿瘤细胞通过针管注射到实验小鼠群体内，等待肿瘤细胞增殖后，观察注射后肿瘤细胞的实验鼠群，通过对比正常鼠群和实验鼠群体征表现情况，筛选出肿瘤细胞成功增殖的实验鼠群。
优选的，所述步骤三中，在观察实验鼠群体征表现情况时，实验鼠群外表皮肤或皮下组织产生块状组织为肿瘤细胞成功增殖，反之，肿瘤细胞在实验鼠群体内被灭活。
优选的，所述步骤四中，制备氯胺-T氧化剂水溶液，在离心管内加入50ug/120ul的纯化抗体，另外加入5ul0.01mol/L磷酸缓冲液，其中一组加入5ul131I/125I混合液，加入10ul氯胺-T，等待45s后加入50ulNa2S2O3作用2min，等待两分钟后向溶液内加入100ulKI溶液，并选择合适蛋白载体，同样的方式中间一组向水溶液内加入5ul32S/35S混合液，最后一组加入2.5ul131I/125I、2.5ul32S/35S的混合溶液，并对溶液进行收集，将溶液放置在不同试剂管内，且保证每个试剂管内溶液为相同容量，对试剂管内溶液进行比度和标记率的测定。
优选的，所述步骤四中，将标记后的溶液导入载体蛋白内，将蛋白载体注入肿瘤细胞成功增殖的实验鼠群内，等待一定时间后，通过核医学显像设备观察标记同位素表达位置。
优选的，所述步骤五中，通过图像显示结果，记录同位素在实验鼠群内表达位置。
与现有技术相比，本发明提供了一种用于肿瘤显像的放射性同位素标记多肽，具备以下有益效果：
1、本发明通过采用两种不同的放射性同位素对患有肿瘤细胞的实验鼠群进行标记，在实验鼠群肿瘤细胞增殖过程中，通过在肿瘤细胞细胞增殖所需氨基酸内添加放射性物质，肿瘤细胞增殖后，能够通过核医学显像设备观察标记同位素表达位置，实现对肿瘤细胞内标记的氨基酸内同位素进行追踪，以便于科研人员了解肿瘤细胞内氨基酸内同位素表达位置；
2、本发明通过采用选取肿瘤细胞表现较为典型的脂肪瘤和皮肤肿瘤，在鼠群实验过程中，通过观察实验鼠群外表，能够直观的观察出肿瘤细胞增殖情况，从而能够有效减少对实验鼠群肿瘤细胞检测步骤，一方面保证了实验鼠群的存活率，另一方面节省了肿瘤检测时间。
附图说明
附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制，在附图中：
图1为本发明提出的用于肿瘤显像的放射性同位素标记多肽的系统流程图；
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1，本发明提供以下技术方案：一种用于肿瘤显像的放射性同位素标记多肽，包括以下步骤：
步骤一：选择合适实验对象；
步骤二：从生物细胞数据库内选取肿瘤细胞，在体外培养肿瘤细胞，建立肿瘤模型，对肿瘤模型内肿瘤细胞进行蛋白检测，获取肿瘤细胞内多肽排列组合顺序；
步骤三：在肿瘤模型内取出部分肿瘤细胞，将肿瘤体内接种在实验对象体内，定期观察肿瘤细胞增殖情况，筛选出接种成功的实验群体；
步骤四：配制氯胺-T氧化剂水溶液，制备标记抗体蛋白，将标记抗体蛋白通过蛋白载体导入到实验群体内，等待肿瘤细胞增殖后通过核医学显像设备观察肿瘤显像情况；
步骤五：通过肿瘤显像情况观察标记抗体蛋白表达情况，并记录数据结果。
本发明中，优选的，步骤一中，从白鼠群体内挑选出年轻、健康、生命力旺盛的实验鼠群，并将实验鼠群放置在环境适宜条件下饲养，步骤二中，在生物细胞数据库内选取鼠群较为典型且容易观察的肿瘤细胞，例如脂肪瘤和皮肤肿瘤，步骤二中，提取生物细胞数据库肿瘤细胞，将肿瘤细胞放置在活化条件下进行活性处理，将活性处理后的肿瘤细胞放置在装有培养液的培养皿内培养，肿瘤细胞增殖后，获取多个实验肿瘤细胞，步骤二中，取出部分实验肿瘤细胞，将实验肿瘤细胞放置在另一组培养皿内，在培养皿内加入适量的蛋白水解酶，测定肿瘤细胞内多肽排列顺序，步骤三中，取出部分肿瘤细胞，将肿瘤细胞通过针管注射到实验小鼠群体内，等待肿瘤细胞增殖后，观察注射后肿瘤细胞的实验鼠群，通过对比正常鼠群和实验鼠群体征表现情况，筛选出肿瘤细胞成功增殖的实验鼠群，步骤三中，在观察实验鼠群体征表现情况时，实验鼠群外表皮肤或皮下组织产生块状组织为肿瘤细胞成功增殖，反之，肿瘤细胞在实验鼠群体内被灭活。
本发明中，优选的，步骤四中，制备氯胺-T氧化剂水溶液，在离心管内加入50ug/120ul的纯化抗体，另外加入5ul0.01mol/L磷酸缓冲液，其中一组加入5ul131I/125I混合液，加入10ul氯胺-T，等待45s后加入50ulNa2S2O3作用2min，等待两分钟后向溶液内加入100ulKI溶液，并选择合适蛋白载体，同样的方式中间一组向水溶液内加入5ul32S/35S混合液，最后一组加入2.5ul131I/125I、2.5ul32S/35S的混合溶液，并对溶液进行收集，将溶液放置在不同试剂管内，且保证每个试剂管内溶液为相同容量，对试剂管内溶液进行比度和标记率的测定，步骤四中，将标记后的溶液导入载体蛋白内，将蛋白载体注入肿瘤细胞成功增殖的实验鼠群内，等待一定时间后，通过核医学显像设备观察标记同位素表达位置，步骤五中，通过图像显示结果，记录同位素在实验鼠群内表达位置。
实施例一：
一种用于肿瘤显像的放射性同位素标记多肽，包括以下步骤：
步骤一：选择合适实验对象；
步骤二：从生物细胞数据库内选取肿瘤细胞，在体外培养肿瘤细胞，建立肿瘤模型，对肿瘤模型内肿瘤细胞进行蛋白检测，获取肿瘤细胞内多肽排列组合顺序；
步骤三：在肿瘤模型内取出部分肿瘤细胞，将肿瘤体内接种在实验对象体内，定期观察肿瘤细胞增殖情况，筛选出接种成功的实验群体；
步骤四：配制氯胺-T氧化剂水溶液，制备标记抗体蛋白，将标记抗体蛋白通过蛋白载体导入到实验群体内，等待肿瘤细胞增殖后通过核医学显像设备观察肿瘤显像情况；
步骤五：通过肿瘤显像情况观察标记抗体蛋白表达情况，并记录数据结果。
本发明中，优选的，步骤一中，从白鼠群体内挑选出年轻、健康、生命力旺盛的实验鼠群，并将实验鼠群放置在环境适宜条件下饲养。
本发明中，优选的，步骤二中，在生物细胞数据库内选取鼠群较为典型且容易观察的肿瘤细胞，例如脂肪瘤和皮肤肿瘤。
本发明中，优选的，步骤二中，提取生物细胞数据库肿瘤细胞，将肿瘤细胞放置在活化条件下进行活性处理，将活性处理后的肿瘤细胞放置在装有培养液的培养皿内培养，肿瘤细胞增殖后，获取多个实验肿瘤细胞。
本发明中，优选的，步骤二中，取出部分实验肿瘤细胞，将实验肿瘤细胞放置在另一组培养皿内，在培养皿内加入适量的蛋白水解酶，测定肿瘤细胞内多肽排列顺序。
本发明中，优选的，步骤三中，取出部分肿瘤细胞，将肿瘤细胞通过针管注射到实验小鼠群体内，等待肿瘤细胞增殖后，观察注射后肿瘤细胞的实验鼠群，通过对比正常鼠群和实验鼠群体征表现情况，筛选出肿瘤细胞成功增殖的实验鼠群。
本发明中，优选的，步骤三中，在观察实验鼠群体征表现情况时，实验鼠群外表皮肤或皮下组织产生块状组织为肿瘤细胞成功增殖，反之，肿瘤细胞在实验鼠群体内被灭活。
本发明中，优选的，步骤四中，制备氯胺-T氧化剂水溶液，在离心管内加入50ug/120ul的纯化抗体，另外加入5ul0.01mol/L磷酸缓冲液，其中一组加入5ul131I/125I混合液，加入10ul氯胺-T，等待45s后加入50ulNa2S2O3作用2min，等待两分钟后向溶液内加入100ulKI溶液，并选择合适蛋白载体，并对溶液进行收集，将溶液放置在不同试剂管内，且保证每个试剂管内溶液为相同容量，对试剂管内溶液进行比度和标记率的测定。
本发明中，优选的，步骤四中，将标记后的溶液导入载体蛋白内，将蛋白载体注入肿瘤细胞成功增殖的实验鼠群内，等待一定时间后，通过核医学显像设备观察标记同位素表达位置。
本发明中，优选的，步骤五中，通过图像显示结果，记录同位素在实验鼠群内表达位置。
实施例二：
一种用于肿瘤显像的放射性同位素标记多肽，包括以下步骤：
步骤一：选择合适实验对象；
步骤二：从生物细胞数据库内选取肿瘤细胞，在体外培养肿瘤细胞，建立肿瘤模型，对肿瘤模型内肿瘤细胞进行蛋白检测，获取肿瘤细胞内多肽排列组合顺序；
步骤三：在肿瘤模型内取出部分肿瘤细胞，将肿瘤体内接种在实验对象体内，定期观察肿瘤细胞增殖情况，筛选出接种成功的实验群体；
步骤四：配制氯胺-T氧化剂水溶液，制备标记抗体蛋白，将标记抗体蛋白通过蛋白载体导入到实验群体内，等待肿瘤细胞增殖后通过核医学显像设备观察肿瘤显像情况；
步骤五：通过肿瘤显像情况观察标记抗体蛋白表达情况，并记录数据结果。
本发明中，优选的，步骤一中，从白鼠群体内挑选出年轻、健康、生命力旺盛的实验鼠群，并将实验鼠群放置在环境适宜条件下饲养。
本发明中，优选的，步骤二中，在生物细胞数据库内选取鼠群较为典型且容易观察的肿瘤细胞，例如脂肪瘤和皮肤肿瘤。
本发明中，优选的，步骤二中，提取生物细胞数据库肿瘤细胞，将肿瘤细胞放置在活化条件下进行活性处理，将活性处理后的肿瘤细胞放置在装有培养液的培养皿内培养，肿瘤细胞增殖后，获取多个实验肿瘤细胞。
本发明中，优选的，步骤二中，取出部分实验肿瘤细胞，将实验肿瘤细胞放置在另一组培养皿内，在培养皿内加入适量的蛋白水解酶，测定肿瘤细胞内多肽排列顺序。
本发明中，优选的，步骤三中，取出部分肿瘤细胞，将肿瘤细胞通过针管注射到实验小鼠群体内，等待肿瘤细胞增殖后，观察注射后肿瘤细胞的实验鼠群，通过对比正常鼠群和实验鼠群体征表现情况，筛选出肿瘤细胞成功增殖的实验鼠群。
本发明中，优选的，步骤三中，在观察实验鼠群体征表现情况时，实验鼠群外表皮肤或皮下组织产生块状组织为肿瘤细胞成功增殖，反之，肿瘤细胞在实验鼠群体内被灭活。
本发明中，优选的，步骤四中，制备氯胺-T氧化剂水溶液，在离心管内加入50ug/120ul的纯化抗体，另外加入5ul0.01mol/L磷酸缓冲液，加入10ul氯胺-T，等待45s后加入50ulNa2S2O3作用2min，等待两分钟后向溶液内加入100ulKI溶液，并选择合适蛋白载体，同样的方式中间一组向水溶液内加入5ul32S/35S混合液，并对溶液进行收集，将溶液放置在不同试剂管内，且保证每个试剂管内溶液为相同容量，对试剂管内溶液进行比度和标记率的测定。
本发明中，优选的，步骤四中，将标记后的溶液导入载体蛋白内，将蛋白载体注入肿瘤细胞成功增殖的实验鼠群内，等待一定时间后，通过核医学显像设备观察标记同位素表达位置。
本发明中，优选的，步骤五中，通过图像显示结果，记录同位素在实验鼠群内表达位置。
实施例三：
一种用于肿瘤显像的放射性同位素标记多肽，包括以下步骤：
步骤一：选择合适实验对象；
步骤二：从生物细胞数据库内选取肿瘤细胞，在体外培养肿瘤细胞，建立肿瘤模型，对肿瘤模型内肿瘤细胞进行蛋白检测，获取肿瘤细胞内多肽排列组合顺序；
步骤三：在肿瘤模型内取出部分肿瘤细胞，将肿瘤体内接种在实验对象体内，定期观察肿瘤细胞增殖情况，筛选出接种成功的实验群体；
步骤四：配制氯胺-T氧化剂水溶液，制备标记抗体蛋白，将标记抗体蛋白通过蛋白载体导入到实验群体内，等待肿瘤细胞增殖后通过核医学显像设备观察肿瘤显像情况；
步骤五：通过肿瘤显像情况观察标记抗体蛋白表达情况，并记录数据结果。
本发明中，优选的，步骤一中，从白鼠群体内挑选出年轻、健康、生命力旺盛的实验鼠群，并将实验鼠群放置在环境适宜条件下饲养。
本发明中，优选的，步骤二中，在生物细胞数据库内选取鼠群较为典型且容易观察的肿瘤细胞，例如脂肪瘤和皮肤肿瘤。
本发明中，优选的，步骤二中，提取生物细胞数据库肿瘤细胞，将肿瘤细胞放置在活化条件下进行活性处理，将活性处理后的肿瘤细胞放置在装有培养液的培养皿内培养，肿瘤细胞增殖后，获取多个实验肿瘤细胞。
本发明中，优选的，步骤二中，取出部分实验肿瘤细胞，将实验肿瘤细胞放置在另一组培养皿内，在培养皿内加入适量的蛋白水解酶，测定肿瘤细胞内多肽排列顺序。
本发明中，优选的，步骤三中，取出部分肿瘤细胞，将肿瘤细胞通过针管注射到实验小鼠群体内，等待肿瘤细胞增殖后，观察注射后肿瘤细胞的实验鼠群，通过对比正常鼠群和实验鼠群体征表现情况，筛选出肿瘤细胞成功增殖的实验鼠群。
本发明中，优选的，步骤三中，在观察实验鼠群体征表现情况时，实验鼠群外表皮肤或皮下组织产生块状组织为肿瘤细胞成功增殖，反之，肿瘤细胞在实验鼠群体内被灭活。
本发明中，优选的，步骤四中，制备氯胺-T氧化剂水溶液，在离心管内加入50ug/120ul的纯化抗体，另外加入5ul0.01mol/L磷酸缓冲液，加入10ul氯胺-T，等待45s后加入50ulNa2S2O3作用2min，等待两分钟后向溶液内加入100ulKI溶液，并选择合适蛋白载体，同样的方式最后一组加入2.5ul131I/125I、2.5ul32S/35S的混合溶液，并对溶液进行收集，将溶液放置在不同试剂管内，且保证每个试剂管内溶液为相同容量，对试剂管内溶液进行比度和标记率的测定。
本发明中，优选的，步骤四中，将标记后的溶液导入载体蛋白内，将蛋白载体注入肿瘤细胞成功增殖的实验鼠群内，等待一定时间后，通过核医学显像设备观察标记同位素表达位置。
本发明中，优选的，步骤五中，通过图像显示结果，记录同位素在实验鼠群内表达位置。
综合上述实施例，通过实验结果可观察出在注射2.5ul131I/125I、2.5ul32S/35S的混合溶液的实验鼠群肿瘤细胞内细胞基质和细胞膜表面均能够检测出同位素表达，在注射5ul131I/125I混合液的实验鼠群肿瘤细胞内细胞基质内能够检测出同位素表达，在注射5ul131I/125I混合液的实验鼠群肿瘤细胞内细胞膜内能够检测出同位素表达。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
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