具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

请参阅图1，一种ECM水凝胶与交联剂混合的三维打印系统，包括ECM水凝胶进样针1和交联剂进样针2，ECM水凝胶进样针1一端设置有第一进样泵3，第一进样泵3外部连接有第一流速控制器4，交联剂进样针2一端设置有第二进样泵5，第二进样泵5外部连接有第二流速控制器6，ECM水凝胶进样针1和交联剂进样针2一端连接有T型针头7，T型针头7一端连接有可调长度挤出头8，可调长度挤出头8内部设置有螺旋形混匀器9，可调长度挤出头8底部设置有打印平台10。

综上，下面给出该一种ECM水凝胶与交联剂混合的三维打印方法的具体实施例；

ECM水凝胶为皮肤制备得到的ECM凝胶，配制方法为：将500μl的ECM原液溶于1XPBS水溶液中，配置得到ECM打印水凝胶打印墨水，置入ECM水凝胶进样针1中，将金尼平溶液装入交联剂进样针2中，作为打印墨水的交联剂。将ECM水凝胶进样针1内ECM打印墨水以140μl/min的流速挤出，金尼平溶液可按照所需要求调整，调整范围为5-10μl/min，将两个注射泵同时开启，把ECM墨水和交联剂同时挤入T型针头7中，T型针头7内的螺旋形混匀器9可将两种溶液混匀，通过调整可调长度挤出头8下段的长度，调整合适的预混匀时间，将打印墨水挤出之后，可在打印平台10上实现最终成型。

本发明的工作使用流程以及安装方法为，本一种ECM水凝胶与交联剂混合的三维打印方法在使用时，以双料筒混合挤出的方式对ECM中的交联剂添加进行控制。

实现该方法的打印系统主要有ECM水凝胶进样针1、交联剂进样针2、第一进样泵3、第一流速控制器4及其相对应的第一流速控制器4、第二流速控制器6，T型针头7及其内部的螺旋形混匀器9组成，首先将需要打印的ECM水凝胶材料置入ECM水凝胶进样针1中，使用第一进样泵3推进使得ECM水凝胶进样针1中的ECM的水凝胶从T型针头7的上部进入；将ECM交联剂置入交联剂进样针2中，使用第二进样泵5推进使得交联剂进样针2中的ECM交联剂从T型针头7的侧面通道进入，第一进样泵3、第二进样泵5分别使用独立的流速控制器控制相应进样针的流速，使得ECM打印墨水的两种成分能够以一定的比例进行混合，在T型针头7内部设置有螺旋形混匀器9，在混合后的ECM打印墨水进入T型针头7时，可以使打印墨水受到相应挤压，混合均匀，可调长度挤出头8采用螺帽进行固定，打印墨水可从可调长度挤出头8下部挤出，并在打印平台10上成型。

该打印方法能够在ECM水凝胶生物墨水打印过程中实时添加所需含量的交联剂，避免直接混匀交联剂之后使ECM生物墨水提前固化成型，导致打印过程失败，同时该打印方法能够实时控制ECM水凝胶生物墨水在打印过程中添加的交联剂含量，能够对打印墨水的成分进行实时精确控制，实现各向异性的生物支架制备。

需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。